腹腔镜胃旁路手术治疗2型糖尿病疗效及机制研究

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第一部分腹腔镜下胃旁路手术治疗2型糖尿病的有效性及安全性评价目的:探讨腹腔镜下胃旁路术(Laparoscopic gastric bypass,LRYGB)治疗2型糖尿病病人的临床有效性及安全性。方法:收集苏州大学附属第一医院腹腔镜微创外科自2010年5月起至2012年2月期间以腹腔镜下胃旁路手术治疗2型糖尿病的临床病例73例,其中随访满5年的有36例。将患者分为高体质指数(body mass index,BMI)组(BMI>27.5)和低BMI组(BMI≤27.5)。随访记录患者的住院时间、手术时间、失血量、手术相关的并发症等临床资料,以及患者术前和术后半年、1年、2年、3年、5年的体重、BMI、腰围、空腹血糖(FBG)、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、C肽、血清胰岛素、血脂及糖尿病并发症等的变化。结果:接受手术治疗的患者术后均顺利出院,无围手术期死亡病例,手术相关并发症(术后30天内)为11%(8/73)。手术后患者的FBG、Hb A1c、体重、BMI、腰围、血清甘油三酯、胆固醇等较术前均有显著下降(P<0.05)。腹腔镜下胃旁路手术治疗2型糖尿病术后5年,低BMI组与高BMI组2型糖尿病的控制率分别为40.0%(6/15),76.2%(16/21),其差异有显著性(P<0.05)。将2型糖尿病得到控制与得到改善病人的术前指标相比较,其中BMI、腰围、糖尿病病程、餐后2小时血糖值和餐后2小时C肽值的统计学比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:腹腔镜下胃旁路手术可安全的施行于伴有或不伴有肥胖的2型糖尿病患者,且无明显不良并发症;肥胖患者的手术疗效优于非肥胖患者。胃旁路手术可有效的减轻肥胖患者的体重、控制2型糖尿病患者的血糖、血脂水平,其远期疗效(5年)稳定。患者术前的BMI、腰围、糖尿病病程、餐后2小时血糖值和餐后2小时C肽值可作为预测手术治疗预后的指标。第二部分腹腔镜下胃旁路手术治疗2型糖尿病后病人外周血micro RNA的表达变化目的:研究腹腔镜下胃旁路术(Laparoscopic gastric bypass,LRYGB)对2型糖尿病(T2DM)病人外周血micro RNA(miRNA)表达水平的影响。方法:采用miRNA表达芯片检测了1例高BMI组T2DM病人手术前、术后1年外周血miRNA的表达水平。参考相关文献,挑选出与糖脂代谢有关的,并在手术前、术后1年表达发生改变的miRNA。在15例接受手术治疗的病人中,对这些miRNA进行实时荧光定量PCR检测,验证其表达水平在手术后是否发生变化。结果:miRNA表达芯片的数据显示,1例高BMI组病人接受LRYGB术后有70个miRNA的表达水平升高了,有74个miRNA的表达水平下降了。挑选出hsa-miR-29a-3p、hsa-miR-122-5p、hsa-miR-124-3p和hsa-miR-320a进一步行定量PCR检测。hsa-miR-29a-3p术后的表达水平在10例T2DM及2例病态肥胖病人的标本中发生了下降,在1例T2DM病人的标本中发生了升高。hsa-miR-122-5p的术后表达水平在10例T2DM病人的标本中发生了下降,在2例病态肥胖病人的标本中发生了升高。hsa-miR-124-3p的术后表达水平在10例T2DM病人的标本中发生了下降,在2例T2DM病人的标本中发生了升高。hsa-miR-320a的术后表达水平在11例T2DM病人及1例病态肥胖病人的标本中发生了下降,在1例T2DM病人及2例病态肥胖病人的标本中发生了升高。结论:胃旁路手术可能通过改变miRNA的表达水平,调控miRNA下游靶基因的功能,来改善胰腺β细胞合成、分泌胰岛素的功能,以及组织细胞对胰岛素的敏感性。miRNA能够作为LRYGB手术治疗的术前胰岛功能评估以及预后预测指标。第三部分腹腔镜胃旁路手术对micro RNA基因启动子甲基化水平的影响目的:研究腹腔镜下胃旁路术(Laparoscopic gastric bypass,LRYGB)对2型糖尿病(T2DM)病人外周血micro RNA(miRNA)基因启动子甲基化水平的影响。方法:采用亚硫酸氢盐测序PCR法(Bisulfite sequencing PCR,BSP)检测1例高BMI组T2DM病人术前及术后1年外周血DNA样本中hsa-miR-29a-3p、hsa-miR-122-5p、hsa-miR-124-3p和hsa-miR-320a基因启动子的甲基化水平。检测的序列范围包括miRNA前体基因上游约200bp,至下游约100bp,总共约400bp的甲基化水平。结果:hsa-miR-124-3p和hsa-miR-320a基因位于Cp G岛(Cp G island)内,hsa-miR-29a-3p和hsa-miR-122-5p的启动子区域不在检测范围内。LRYGB对这4个miRNA前体基因附近的Cp G位点的甲基化水平无明显影响(P>0.05)。结论:hsa-miR-124-3p和hsa-miR-320a的表达受附近CpG位点甲基化水平的影响。LRYGB不通过改变DNA的甲基化水平来调节miRNA的表达水平。
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