目的:1.大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养,观察其形态特征及鉴定表面标志物。2.对大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化和成骨分化进行研究。3.观察不同浓度PTH1-34对大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的影响,探讨其可能机制。方法:1.采用贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察其形态、细胞生长曲线,式细胞仪检测表面标志物及细胞周期。2.诱导BMSCs定向分化为脂肪细胞和成骨细胞,并通过组织染色法鉴定分化后的细胞。3.以第三代BMSCs为体外试验模型,不同浓度甲状旁腺激素(PTH1-34)(0、10-10、10-9、10-8mol/L)分别作用于加入成脂诱导液的BMSCs,14天后采用ELISA法测定LPL活性,采用RT-PCR法测定ALP和PPARγ-2 m RNA表达水平,观察不同浓度PTH1-34对BMSCs成脂分化的影响。4.统计学方法采用统计学软件SPSS13.0软件进行分析,计量资料的表示用X±S,采用方差分析和LSD-t检验进行各组间比较,P<0.05差异具有统计学意义。结果:1.BMSCs贴壁生长,均一长梭形,生长曲线为“S”型。细胞周期测定大部分处于G1/G0期。P3代BMSCs阳性表达CD44、CD29,阴性表达CD45。2.成脂诱导液诱导BMSCs分化21天后,油红O染色可见胞内脂滴出现,成骨诱导28天后,茜素红染色可见钙结节。3.不同浓度PTH1-34(10-10、10-9、10-8、mol/L)分别作用于BMSCs后,与未加入PTH1-34的对照组比较,LPL、PPARγ-2的表达量下降,ALP活性明显增加,并呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.BMSCs形态为均一长梭形;稳定表达CD44、CD29,不表达CD45;BMSCs具有向脂肪细胞和成骨细胞分化的潜能。2.PTH1-34抑制BMSCs成脂分化,促进其成骨分化,并呈剂量依赖性。3.PTH1-34可能是通过下调PPARγ-2的表达量来抑制BMSCs向脂肪细胞分化。