新型抗生素AGPM的分离纯化和过程优化

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本文工作在于研究考察在发酵法生产新型抗生素AGPM的发酵液分离纯化过程中,几种重要因素对AGPM稳定性的影响,从而确定合理的分离纯化过程和工艺条件。由于AGPM是生物大分子,具有生理活性和药理作用,在分离纯化过程中,须根据其特点,在保持其生物机能的前提下进行分离纯化操作。本文就AGPM在分离纯化过程中,对热、溶液的酸碱性、酶及试剂等因素所影响的稳定性进行了考察和研究,归纳了其对AGPM活性影响的规律,确定了合理的分离纯化过程和工艺。利用TLC技术、HPLC技术及抗菌生物检测技术跟踪分离纯化过程中AGPM的活性组分的变化,已经对其活性的衰变过程有了更为清楚的了解,为AGPM稳定性的进一步研究提供了依据。本课题的研究证明:发酵液中的抗生素AGPM对温度表现出不稳定性,其操作极限温度应低于50℃,在75℃环境中AGPM会以较快速度失去活性;pH值对AGPM的活性影响最显著,分离纯化过程首先要将AGPM的pH值调至9;在酸性环境中或在某些得电子体试剂的存在下,AGPM会很快地失去活性,而在碱性环境中或某些含氨基给电子体试剂存在下,其活性会更加稳定;温度、pH值、去除蛋白这三种因素存在不同程度的交互作用,碱性条件下,热稳定性好于酸性条件;除蛋白后的热稳定性好于未除蛋白的热稳定性;分离提纯的优化工艺条件是:在30℃、pH值9、用乙醇去除蛋白。
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