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卵母细胞冷冻复苏后的复苏率、受精率、胚胎发育率和成活率一直不理想，导致这种现象的原因比较复杂，其中胞内钙离子浓度的升高可能是发育率降低的一个重要原因。为了探究细胞内钙离子的改变对卵母细胞造成的影响，本研究通过透射电子显微镜、激光扫描共聚焦显微镜等对冷冻前后各组卵母细胞的超微结构、精子穿透、透明带消化、发育率以及钙离子浓度和波动进行研究。结果发现: (1)透射电子显微镜下，新鲜对照组、毒胡萝卜素(Thapsigargin，TG)处理组、2-氨基乙氧基苯硼酸（2-Aminoethoxydiphenyl borate，2-APB）处理组卵母细胞的透明带和线粒体结构都比较完整;而冷冻组、TG冷冻组卵母细胞的冷冻损伤较严重，透明带变宽，边缘处破损，卵周隙变宽，线粒体结构模糊不清;2-APB冷冻组卵母细胞损伤较轻，透明带和线粒体等细胞器结构只有部分出现模糊。 (2)透明带消化时间和透明带结合精子个数:2-APB冷冻组(230.5±7.14，4.17±1.11)、TG冷冻组(172.5±5.91，1.17±1.03)、冷冻组(221.22±9.46，2.75±1.29)与新鲜对照组（300.14±7.45，8.00±2.45）相比透明带消化时间均显著降低、透明带结合精子个数也显著减少(P＜0.05);而2-APB冷冻组与TG冷冻组和冷冻组相比透明带消化时间显著升高、透明带结合精子个数也显著增加（P＜0.05）。 (3)从各组的发育率结果发现，冷冻组(59.39％)、TG处理组(71.91％)和TG冷冻组(52.29％)、2-APB处理组(85.71％)和2-APB冷冻组(66.39％)的卵裂率与新鲜对照组(79.45％)相比，均有显著性差异(P＜0.05);TG冷冻组(52.29％)的卵裂率与TG处理组(71.91％)相比，显著降低(P＜0.05);2-APB冷冻组(66.39％)与2-APB处理组(86.03％)卵裂率相比，显著降低（P＜0.05）。 (4)激光扫描共聚焦显微镜检测发现，各实验组的细胞内钙离子浓度，组间均有显著性差异(P＜0.05)，其中2-APB冷冻组（122.21±4.33）与TG冷冻组（146.87±7.49）、冷冻组（139.70±6.00）相比，细胞内钙离子浓度显著降低(P＜0.05)。检测细胞内钙离子的浓度波动发现，对照组钙离子一直保持动态稳定状态，处理组、TG组、2-APB组都明显地出现钙振荡，2-APB组钙震荡的峰值都明显低于另外两组，且整个钙震荡持续的时间也比另外两组短。 结果表明，TG会使胞内钙离子的浓度升高，使透明带硬化、破损程度更加严重，发育率降低;而使用2-APB处理冷冻卵母细胞能够一定程度上地降低胞内钙离子的浓度，使卵母细胞损伤程度降低，发育率升高，因此2-APB可被应用在细胞冷冻过程中降低冷冻对卵母细胞的损伤。