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目的:1探讨LAT1和LAT3在类风湿滑膜细胞中的功能和机制。2探讨LAT1和LAT3在类风湿滑膜细胞中的表达调控。方法:1采用qRT-PCR的方法检测LATs在滑膜组织中的表达;设计合成LAT1和LAT3的siRNA;分离培养原代滑膜成纤维细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA FLS);siRNA沉默RA FLS中LAT1和LAT3的表达;qRT-PCR和Western Blot检测沉默效率;采用MTS法和Transwell法检测沉默LAT1和LAT3后RA FLS的增殖和侵袭能力;采用[~~3H]-L-leucine吸收实验检测沉默LAT1/LAT3和LATs抑制剂BCH对RA FLS亮氨酸吸收的影响;采用qRT-PCR的方法检测沉默LAT1/LAT3和LATs抑制剂BCH对RA FLS中MMPs表达的影响;采用Western Blot的方法检测LATs的抑制剂BCH对RA FLS中mTOR和P70S6K活性的影响。2采用炎性因子IL-17、TNF-α和LPS刺激RA FLS,并用qRT-PCR的方法检测LAT1和LAT3在m RNA水平表达的变化;采用Transwell法检测IL-17对RA FLS侵袭的影响,然后分别检测LAT1siRNA、LAT3 siRNA和BCH与IL-17协同作用对RA FLS侵袭能力的影响;IL-17刺激RA FLS的同时,采用信号通路抑制剂PDTC、Stattic、Temsirolimus、PD98059分别抑制NF-κB、STAT3、mTOR、MEK信号通路,用qRT-qPCR的方法检测LAT1和LAT3,探讨通路抑制剂对IL-17刺激作用的影响。结果:1在RA滑膜组织中主要有LAT1、LAT2和LAT3三个LATs家族成员的表达,与OA相比,LAT1和LAT3的表达明显升高(***P<0.001,*P<0.05);si RNA特异性抑制LAT1和LAT3的表达后,RA FLS中LAT1和LAT3在mRNA和蛋白表达水平明显降低(**P<0.01,*P<0.05),沉默效率达70%;MTS法结果显示siRNA沉默LAT1和LAT3后,RA FLS的增殖能力无明显变化(P>0.05);Transwell法实验结果显示siRNA沉默LAT1和LAT3后,RA FLS的侵袭力明显降低(***P<0.001,***P<0.001);[~~3H]-Lleucine吸收实验结果显示siRNA沉默LAT1和LAT3后,RA FLS对氨基酸的吸收明显降低(***P<0.001,***P<0.001);LATs抑制剂BCH可以明显降低RA FLS对[~~3H]-L-leucine的吸收(*P<0.05)、明显减弱RA FLS的侵袭能力(*P<0.05),同时明显减弱RA FLS中信号通路分子mTOR的活性。2炎性因子IL-17、LPS、TNF-α刺激RA FLS后,只有IL-17可以显著提高LAT1和LAT3的表达水平(***P<0.001,***P<0.001),并且具有浓度依赖性和时间依赖性(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001);Transwell法结果显示,炎性因子IL-17刺激可以明显促进RA FLS的侵袭(***P<0.001),且IL-17对RA FLS的促侵袭作用可以被LAT1 siRNA、LAT3 siRNA、及LATs抑制剂BCH逆转(**P<0.01,***P<0.001);在PDTC、Stattic、Temsirolimus、PD98059四种通路抑制剂中,mTOR信号通路抑制剂Temsirolimus可以明显逆转炎性因子IL-17对LAT1的上调,而NF-κB抑制剂PDTC可以逆转IL-17对LAT3的上调(***P<0.001)。结论:1 RA滑膜组织中主要有LAT1、LAT2和LAT3的表达,与OA相比,LAT1和LAT3的表达明显升高,并且LAT1和LAT3可能通过影响氨基酸的吸收来影响mTOR的活性,进而影响细胞的侵袭。2炎性因子IL-17通过mTOR信号通路上调LAT1的表达,通过NF-κB信号通路上调LAT3的表达,并且其上调作用具有浓度依赖性和时间依赖性;LAT1和LAT3可介导IL-17对RA FLS的促侵袭作用。