激酶在细胞增殖、分化和代谢等生理过程的调控中担任着重要的角色。众多的人类疾病与激酶的活性异常有着直接或者间接的关系。因此对激酶活性的分析检测对于生化研究、临床诊断及对重大疾病的药物靶向治疗等都具有重要意义。研究快速、简单、灵敏度高和特异性好的检测激酶活性的新方法具有广泛的应用前景。本论文以蛋白激酶和己糖激酶为研究对象，主要应用荧光共轭聚合物、功能性磁性微球、便携式血糖仪等生物传感器为技术平台，结合分子荧光、荧光成像等检测技术，研究建立了一系列检测激酶活性的新方法，主要内容如下：1．基于阴离子荧光共轭聚合物的荧光共振能量转移作用，发展了一种均相、通用型的新型生物传感器，用于蛋白激酶活性的检测。水溶性荧光共轭聚合物（PFPaa）带有氨基二乙酸的侧链，它与金属离子（Zr4+）形成配位化合物。荧光标记的肽底物在蛋白激酶的作用下被磷酸化，其磷酸基团与Zr4+特异性结合。以Zr4+为“桥梁”，PFPaa与标记在肽上的荧光基团被拉近，产生了强烈的荧光共振能量转移（FRET），并对荧光信号进行放大，由此可实现对蛋白激酶活性的高灵敏度检测。该方法操作简便，可检测0.0005U·μL-1~1U·μL-1的蛋白激酶，并可用于抑制剂的筛选。2．将TiO2修饰在Fe3O4/SiO2磁性微球表面。荧光标记的底物肽在蛋白激酶存在时被磷酸化，其磷酸基团与Ti4+特异性结合，从而被富集在磁性微球表面。通过对富集的磷酸化肽上标记的荧光进行检测或对磁性微球表面荧光成像进行分析，可以实现对蛋白激酶活性的高灵敏度检测。该方法对蛋白激酶活性的测定范围为0.0005U·μL-1~0.5U·μL-1，检出限为0.0001U·μL-1。该方法成功的应用于细胞裂解液中蛋白激酶活性检测及蛋白激酶活性抑制剂的筛选。此外对不同的蛋白激酶底物肽标记不同的荧光基团，还可以实现对不同蛋白激酶的同时检测。3．基于便携式血糖仪，建立了一种简单、快速、均相测定已糖激酶活性的方法。己糖激酶催化葡萄糖的磷酸化，磷酸化的葡萄糖在血糖仪上不产生响应信号，以商品化的便携式血糖仪作为实验信号测定设备，根据体系中剩余葡萄糖的含量，间接测得己糖激酶的活性。本方法的检测范围为10-6U·μL-1~10-2U·μL-1，这种新的分析方法也可应用于己糖激酶抑制剂的高通量筛选。