目的:观察db/db小鼠肝组织及高糖处理的Hep G2细胞胰高血糖素受体(Glucagon receptor,GCGR)的表达及作用的变化,并探索高糖处理的Hep G2细胞中YWHAB介导GCGR对糖代谢的影响。方法:Western blot或免疫组化检测db/db小鼠肝脏和有无胰高血糖素(Glucagon,GLN)作用下不同糖浓度或高糖处理不同时间的Hep G2细胞中GCGR、蛋白激酶A(c AMP-dependent protein kinase A,PKA)、磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)的表达变化。构建慢病毒载体过表达及干扰YWHAB的稳转Hep G2细胞株,高糖处理过表达及干扰YWHAB的Hep G2细胞,在有无GLN刺激下,检测细胞培养液中葡萄糖浓度,Western Blot法检测关键酶葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、糖原合成酶激酶(GSK3β)和己糖激酶II(HK-2)蛋白表达变化。结果:(1)与对照小鼠相比,db/db小鼠肝脏GCGR表达增加,PKA磷酸化水平下降;Hep G2细胞在GLN刺激下,随着高糖处理时间的增加,GCGR蛋白表达水平逐渐升高,p-PKA/PKA水平则较对照组降低。(2)无论有无GLN刺激,Hep G2细胞过表达YWHAB降低细胞培养液葡萄糖的浓度,G6Pase、PEPCK、GSK3β及HK-2蛋白表达量均下降。相反,干扰Hep G2细胞中YWHAB的表达,细胞培养液中葡萄糖浓度、G6Pase、PEPCK、GSK3β和HK-2蛋白表达量均增加。结论:慢性高糖增加肝脏GCGR的表达,并导致肝脏胰高血糖素作用不敏感。高糖对待的Hep G2细胞中,无论有无GLN刺激,YWHAB均可通过抑制糖异生、增加糖原合成和促进糖酵解的途径减少葡萄糖的产生。