【摘 要】
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目的:探索碘酸钾在体外环境中对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其相关的分子机制。方法:对TPC-1细胞进行体外细胞培养、传代,用0 mol/L、10-10mol/L、10-8mol/L、10-6mol/L、10-4mol/L、10-2mol/L浓度的碘酸钾处理TPC-1细胞,采用MTT实验、划痕实验以及Transwell实验,计算细胞相对增殖率、迁移指数及穿膜细胞数量,分析TP
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目的:探索碘酸钾在体外环境中对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其相关的分子机制。方法:对TPC-1细胞进行体外细胞培养、传代,用0 mol/L、10-10mol/L、10-8mol/L、10-6mol/L、10-4mol/L、10-2mol/L浓度的碘酸钾处理TPC-1细胞,采用MTT实验、划痕实验以及Transwell实验,计算细胞相对增殖率、迁移指数及穿膜细胞数量,分析TPC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力。再通过实时荧光定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹Western Blot,分别从基因与蛋白水平检测TPC-1细胞中Wnt/β-catenin信号通路的关键下游目标β-catenin、c-myc和cyclin D1的m RNA和蛋白表达水平变化,分析碘酸钾在体外环境中影响TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭的分子机制。结果:1、细胞增殖、迁移及侵袭:在(0-10-6)mol/L碘酸钾浓度范围内,TPC-1细胞的相对增殖率、迁移指数及穿膜数目与碘酸钾的浓度呈正相关,在10-6mol/L组时TPC-1细胞的相对增殖率、迁移指数及穿膜数目达到最大,依次为1.17±0.03、（92.80±0.84）%及（107.80±2.86）个,均显著高于对照组（P<0.001）。在(10-6-10-2)mol/L碘酸钾浓度范围内,TPC-1细胞的相对增殖率、迁移指数及穿膜数目与碘酸钾的浓度呈负相关,在10-2mol/L组时TPC-1细胞的相对增殖率、迁移指数及穿膜数目达到最小,依次为0.92±0.04、（60.20±1.48）%及（35.40±2.97）个,均显著低于对照组（P<0.001）。2、m RNA表达水平:q RT-PCR检测48 h时TPC-1细胞Wnt/β-catenin信号通路下游目标β-catenin、c-myc及cyclin D1基因的m RNA相对表达量。在(0-10-6)mol/L碘酸钾浓度范围内,TPC-1细胞β-catenin、c-myc和cyclin D1的m RNA相对表达量与浓度呈正相关,且在10-6mol/L组时m RNA相对表达量最高,依次分别为1.57±0.07、1.25±0.06、1.44±0.03,均显著高于对照组（P<0.001）;在(10-6-10-2)mol/L碘酸钾浓度范围内,TPC-1细胞β-catenin、c-myc及cyclin D1的m RNA相对表达量与碘酸钾浓度呈负相关,且在10-2mol/L组时m RNA相对表达量最低,分别为0.94±0.04、0.84±0.05、0.96±0.03,均显著低于对照组（P<0.001）。3、蛋白质表达水平:Western Blot检测48 h时TPC-1细胞Wnt/β-catenin信号通路下游目标β-catenin、c-myc及cyclin D1的蛋白相对表达量,在(0-10-6)mol/L碘酸钾浓度范围内,β-catenin、c-myc和cyclin D1的蛋白相对表达量与浓度呈正相关,在10-6mol/L组时三者的蛋白相对表达量分别为0.90±0.03、0.84±0.02、0.89±0.02,均显著高于对照组（P<0.001）;在(10-6-10-2)mol/L碘酸钾浓度范围内,TPC-1细胞β-catenin、c-myc及cyclin D1的蛋白相对表达量与碘酸钾浓度呈负相关,且在10-2mol/L组时三者的蛋白相对表达量分别为0.63±0.03、0.50±0.03、0.51±0.01,均显著低于对照组（P<0.05）。结论:1、(0-10-6)mol/L的碘酸钾可通过上调Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、c-myc、cyclin D1的表达,促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移、侵袭。2、(10-6-10-2)mol/L的碘酸钾可通过下调Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、c-myc、cyclin D1的表达,抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移、侵袭。
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