铅致人淋巴细胞DNA双链断裂作用的流行病学调查和体外实验研究

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目的应用流式细胞术检测γH2AX蛋白,结合人群调查和体外实验,分析铅致人淋巴细胞DNA双链断裂作用,探索流式细胞术检测γH2AX以评价人群DNA双链断裂水平的可行性。方法选取某蓄电池厂工人67例和对照人群70例,采外周静脉血提取淋巴细胞,利用流式细胞术检测γH2AX蛋白,分析淋巴细胞DNA双链断裂水平;不同剂量、时间下醋酸铅染毒健康人外周血淋巴细胞,利用流式细胞术检测γH2AX蛋白,分析淋巴细胞DNA双链断裂水平。结果人群调查结果显示高浓度组(41.76%±28.57%;9.90±3.35)、低浓度组(33.18%±30.64%;9.39±4.83)、内对照组(35.87%±34.09%;10.04±5.77)DNA损伤率和平均荧光强度均高于外对照组(0.28%±0.28%;6.95±2.93),差异有统计学意义(P<0.05);性别、吸烟、饮酒、工龄对职业铅暴露工人DNA损伤水平无影响(P>0.05);偏相关分析结果显示内对照组DNA损伤率和平均荧光强度与年龄存在相关性(r=-0.430、-0.391,P<0.05),铅暴露高浓度组平均荧光强度与血铅、δ-ALA存在相关性(r=0.621、-0.697, P<0.05)。体外实验结果显示1h和2h染毒组中除62.5μmol/L外,125μmol/L、250μmol/L、500μmol/LDNA损伤率均与阴性对照组、阳性对照组存在统计学差异(P<0.01),随着染毒剂量增高,DNA损伤率呈现先增高后降低趋势;各浓度组吸光度值均低于阴性对照组,但未见剂量效应关系,2h组吸光度值均低于1h组。结论铅致DNA双链断裂损伤可能是DNA修复抑制、DNA断裂、DNA-DNA交联、DNA-蛋白质交联多方面作用因素共同结果,流式细胞术检测yH2AX是一种值得运用于检测大样本DNA双链断裂水平的方法。
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