【摘 要】
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目的构建死亡受体6(Death Receptor6,DR6)真核表达载体，并在人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中稳定表达以探讨DR6对人神经母细胞瘤细胞的影响机制。方法以FG30-DR6为模板，PCR扩增
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目的构建死亡受体6(Death Receptor6,DR6)真核表达载体，并在人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中稳定表达以探讨DR6对人神经母细胞瘤细胞的影响机制。方法以FG30-DR6为模板，PCR扩增出DR6基因全长，目的片段连接至真核表达载体pTK643，酶切测序正确后，通过慢病毒感染细胞的方法，在SH-SY5Y细胞上建立稳定表达DR6的细胞系，应用流式细胞术和Western blot检测DR6的表达。通过生长曲线的方法检测DR6对SH-SY5Y细胞的影响。结果通过构建pTK643-DR6真核表达载体，采用慢病毒感染的方法构建稳定表达DR6的细胞株。Western blot及流式细胞术的结果显示，成功获得了稳定表达DR6的SH-SY5Y细胞系。生长曲线的结果表明，高水平表达DR6促进SH-SY5Y细胞的死亡，而低水平表达DR6对SH-SY5Y细胞的影响并不显著。结论成功建立了稳定表达DR6的SH-SY5Y细胞系，这为进一步研究DR6的功能及其在神经肿瘤中的作用提供了细胞模型和实验数据。高水平表达的DR6影响SH-SY5Y细胞的增殖，低水平表达DR6对SH-SY5Y细胞的影响并不明显，但其确切机制仍需进一步研究。
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