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目的:本研究以乳康汤的制备工艺及质量标准研究为出发点,结合经典的提取方法、分析技术及统计方法,旨在优化乳康汤的制备工艺,并建立乳康汤的质量评价体系,为乳康汤的批量生产及临床应用提供参考。材料与方法:1.采用正交试验设计法,对鹿角的粉碎粒度、加水量、煎煮时间进行考察,以出膏率为评价指标,优化乳康汤中鹿角的最佳制备工艺。2.采用Box-behnken响应面法,选取煎煮时间、煎煮次数和料液比进行考察,以阿魏酸、淫羊藿苷的含量及出膏率为评价指标,结合层次分析法确定各评价指标的权重系数,优化乳康汤其余十二味药的最佳制备工艺。3.采用硅胶G板薄层色谱法,以三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展至15cm左右,取出,晾干,在紫外光灯（365nm）下检视。对乳康汤中的柴胡药材进行薄层鉴别。4.采用硅胶G板薄层色谱法,以环己烷-丙酮-乙酸乙酯-乙酸（94:5:5:2）为展开剂,展至15cm左右,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,在105℃加热10min,置紫外光灯（365nm）下检视。对乳康汤中的莪术药材进行薄层鉴别。5.通过高效液相色谱法,采用梯度洗脱和波长切换的方法测定乳康汤中阿魏酸、丹酚酸B、淫羊藿苷的含量。色谱柱:Agi Lent EC-C18（150mm×4.6mm,4μm）;流动相A为乙腈,流动相C为1%的甲酸水;流速1m L/min;柱温:25℃;进样量10μL。6.通过高效液相色谱法,采用等度洗脱的方式测定乳康汤中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。色谱柱:Agi Lent EC-C18（150mm×4.6mm,4μm）;流动相:乙腈-1%甲酸水（18:82）;检测波长:260nm;流速1m L/min;柱温:25℃;进样量10μL。7.通过高效液相色谱法,采用等度洗脱的方式测定乳康汤中延胡索乙素的含量。色谱柱:Agi Lent EC-C18（150mm×4.6mm,4μm）;流动相:乙腈-1%甲酸水（19:81）;检测波长:280nm;流速1m L/min;柱温:25℃;进样量10μL。8.通过高效液相色谱法,采用等度洗脱的方式测定乳康汤中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5种成分的含量。色谱柱:Agi Lent EC-C18（150mm×4.6mm,4μm）;流动相:甲醇-1%甲酸水（75:25）;检测波长:254nm;流速1m L/min;柱温:25℃;进样量10μL。9.通过高效液相色谱法,采用梯度洗脱的方式建立乳康汤的指纹图谱。色谱柱:Agi Lent EC-C18（150mm×4.6mm,4μm）;流动相A为乙腈,流动相C为1%的甲酸水;检测波长:286nm;流速1m L/min;柱温:25℃;进样量20μL。结果:1.确定乳康汤的最佳制备工艺为:将鹿角粉碎,粉碎粒度为80目;共煎煮4次,第一、二次加8倍量水,每次煎煮3小时,第三、四次加6倍量水,每次煎煮2小时,合并滤液,浓缩至50%量备用。将其余十二味药加水煎煮3次,每次煎煮2h,加12倍量水,合并滤液及备用浓缩液,浓缩至1000m L。经验证,测得平均综合评分为96.6,实测值与预测值的偏差为1.8%。2.在乳康汤薄层色谱中,经碱化萃取的供试品溶液与柴胡对照药材在色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性液无干扰;经环己烷提取的供试品溶液与莪术对照药材在色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性液无干扰。3.本研究通过HPLC波长切换法测定阿魏酸、丹酚酸B、淫羊藿苷的含量,其进样量分别在0.0053310.02666μg,0.29001.450μg,0.048000.2400μg范围内与峰面积呈现良好的线性关系,加样回收率（n=5）在97.1%100.3%,RSD在2.3%2.6%。测定结果分别为0.01251mg/m L、0.5362mg/m L、0.1067mg/m L。4.本研究通过HPLC法测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,其进样量在0.11300.5650μg范围内与峰面积呈现良好的线性关系,加样回收率（n=5）在99.3%,RSD在2.3%。测定结果为11.78μg/m L。5.本研究通过HPLC法测定延胡索乙素的含量,其进样量在0.15680.7840μg范围内与峰面积呈现良好的线性关系,加样回收率（n=5）在99.7%,RSD在2.6%。测定结果为18.38μg/m L。6.本研究通过HPLC法测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5种成分的含量,其进样量分别在0.031650.2110μg、0.0016960.01130μg、0.013920.0928μg、0.023280.1552μg、0.11580.7720μg范围内与峰面积呈现良好的线性关系,加样回收率（n=5）在98.3%101.9%,RSD在2.3%2.9%。测定结果分别为37.30μg/m L、1.654μg/m L、17.10μg/m L、15.02μg/m L、98.2μg/m L。7.通过建立10个批次乳康汤的HPLC指纹图谱,共确立了22个色谱共有峰,并指认出7个色谱峰,其中3号峰为阿魏酸;5号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷;11号峰为丹酚酸B;15号峰为淫羊藿苷;18号峰为芦荟大黄素;20号峰为大黄酸;22号峰为大黄素。其中11号色谱峰丹酚酸B峰面积较大,保留时间相对适宜且分离度较好,故可将其作为参照峰。各个批次乳康汤HPLC指纹图谱的相似度均大于0.982。结论:1.正交试验设计及基于响应面法结合层次分析法优化乳康汤的制备工艺,经3组实验结果验证,该制备工艺合理,稳定可行,为乳康汤的生产制备提供依据。2.建立的薄层色谱法,能高效准确地鉴别出乳康汤中的柴胡、莪术药材,该方法操作简便,稳定可行,可用于乳康汤的质量控制。3.采用高效液相色谱法,可测定乳康汤中10种成分的含量,为乳康汤质量的综合评价奠定了基础。建立的HPLC指纹图谱,可为乳康汤在质量控制方面提供参考。