抗菌肽因其具有广谱抗菌活性,已成为科研工作者研究的热点。抗菌肽的阳离子性和两亲性可介导其与细菌细胞表面阴离子组分的相互作用,破坏细胞膜导致细胞死亡。近年来,关于抗菌肽与膜的作用机制已逐步展开,但是其作用机理仍然没有一个权威的解释。Uperin 3.5 和 Uperin 3.6 是源于澳大利亚小蟾 ToadletUperoleia mjobergii的皮肤分泌物,能够抑制革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及真菌,表现出抗菌活性,具有潜在的应用前景。Uperin3.5和Uperin3.6大部分序列相同,但表现出了显著不同的聚集倾向性。Uperin3.5和Uperin3.6的抗菌机制目前尚不明确。本文主要探讨了 Uperin 3.5和Uperin 3.6的聚集差异及影响差异的关键位点,同时研究了其与不同的模拟膜的相互作用,旨在阐明Uperin3.5和Uperin3.6聚集与结构的关系及其抑菌机制。本文首先运用预测淀粉样纤维形成倾向性的软件分析Uperin 3.5聚集的关键位点,在潜在的关键位点对Uperin 3.5和Uperin 3.6进行交换突变。运用硫黄素T结合荧光、圆二色谱等对突变体小肽的聚集和结构进行了检测。结果显示两种抗菌肽聚集的关键位点是位于C端的最后两个疏水氨基酸,由其疏水性量的差异所决定。这一成果可为阐明淀粉样纤维的聚集机制做出贡献。其次利用硫黄素T结合荧光、圆二色谱、荧光泄露等方法检测了 Uperin3.5和Uperin 3.6与不同组分的膜之间的相互作用。结果显示Uperin 3.5和Uperin 3.6与膜的相互作用依赖于膜的形式和组分,该相互作用对抗菌肽的聚集和膜的完整性都有影响。这些成果可为Uperin 3.5和Uperin 3.6抗菌机制的阐明做出贡献。