蜂房哈夫尼菌群体感应信号分子基因表达的研究

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蜂房哈夫尼菌是一种条件致病菌,可导致海产品、肉制品、乳制品、果蔬等食品的腐败变质。为了进一步确定群体感应机制在食品腐败中的作用,并针对群体感应系统为食品防腐保鲜提供新策略,研究主要采用荧光定量PCR技术,研究了环境因素对蜂房哈夫尼菌群体感应信号分子基因luxI和luxR相对表达量的影响。为了准确研究luxI和luxR基因表达量的差异,本文首先研究了16S rRNA、23S rRNA、recA和gapA等4种候选内参基因在不同实验条件下的表达情况,发现它们的表达丰度由高到低依次为16S rRNA>23S rRNA>recA>gapA。使用NormFinder和Best Keeper程序分析后,最终确认16S rRNA表达最为稳定,并作为内参基因用于后续实验。研究了不同氯化钠浓度、pH及温度对luxI和lux R基因相对表达量的影响。结果表明,随着氯化钠浓度的增加、pH值的上升及温度的升高,两种基因的相对表达量同步变化。当氯化钠浓度为1%、pH为7.5或温度为10℃和25℃时,luxI和luxR基因的表达量较高;而培养条件在氯化钠浓度3%以上、pH不为7.5或温度在4℃以下或37℃以上时,luxI和luxR基因的表达受到抑制。
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