保幼激素类似物对意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)工蜂上颚腺分泌10-HDA的影响

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在蜜蜂中,蜂王上颚腺合成蜂王物质,而工蜂上颚腺合成蜂王浆中最主要的不饱和脂肪酸--10-羟基-2-癸烯酸(10-hydroxy-2-decenoic acid,10-HDA)。10-HDA 不仅是蜜蜂食物中最重要的抑菌成分,同时它还是影响雌性蜜蜂级型分化的重要活性物质之一。保幼激素(juvenile hormone,JH)是昆虫体内最重要的激素之一,对蜜蜂幼虫的生长发育,级型分化,成蜂的社会分工与行为发育,腺体发育都有广泛的影响。为了弄清JHIII与工蜂上颚腺及其分泌10-HDA的关系,本试验在研究了意蜂工蜂体内JHIII滴度与上顎腺中10-HDA含量关系的基础上,进一步应用保幼激素类似物(JHA)处理工蜂,考查JH对上颚腺分泌10-HDA以及腺体超微结构的影响。为探明工蜂体内JHIII与上颚腺10-HDA之间的关系,应用HPLC测定了 0、5、10、15、20、25日龄的意蜂工蜂上颚腺10-HDA含量以及体内JHIII滴度,结果发现10-HDA含量与JHIII滴度均随着日龄的变化而变化;而且,10-HDA含量(y)与JHⅢ含量(x)之间呈高度正相关(y=3.401x-40.593,r=0.999,P<0.01)。说明,JHIII滴度可能影响上颚腺分泌10-HDA的活动。为了明确保幼激素对成年工蜂上颚腺合成10-HDA的影响。首先对JHA的溶剂选择进行了研究。对不同体积二甲亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)、异丙醇、丙酮以及正己烷分别处理刚出房意蜂工蜂,再检测10-HDA的含量。结果显示,1μL的异丙醇处理的工蜂死亡率与对照组的无显著差异(P>0.05),而5μLDMSO、DMF、丙酮和异丙醇处理后,工蜂死亡率极显著(P<O.01)高于0.5μL、lμL和2μL处理组和对照组。1μL异丙醇,丙酮和正己烷处理刚出房意蜂工蜂后,用HPLC方法测定了 2、5、8日龄的工蜂上颚腺内10-HDA含量,在5日龄时丙酮处理组10-HDA含量显著(P<0.05)高于对照组,8日龄时正己烷处理组显著(P<0.05)高于对照组,异丙醇处理组与均无显著差异。用200μg、50μg、25μg JHA和1μL异丙醇处理刚出房意蜂工蜂后,结果表明,200μg阽处理组死亡率显著高于其他处理组和对照组;200 μg和50 μg JHA处理组在3日龄时极显著(P<0.01)促进上颚腺分泌10-HDA,5日龄时200μg 处理组显著(P<0.05)低于空白对照组,25 μg处理组极显著(P<0.01)低于空白对照组。用200 μg、50 μg、25μgJHA和1μL异丙醇处理刚出房意蜂工蜂后,3日龄200 μg处理组电镜图显示,细胞内出现了髓鞘结构,染色质浓缩且有一定程度边缘化,50μg和200μg处理组细胞微绒毛比25 μg处理组和对照组丰富,且细胞内的储存池数量多。5日龄时,200μg处理组细胞内髓鞘结构数量增加,而200 μg和25μg处理组细胞内储存池数量减少,微绒毛数量少于对照组。试验表明,意蜂工蜂血淋巴内的JHⅢ含量与上颚腺分泌的10-HDA含量有显著的正相关关系,且JHA对工蜂上颚腺合成10-HDA有显著影响,但影响具有时效性并与剂量有关,JHA能影响腺细胞内储存池和微绒毛的数量。
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