非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)引起的一种急性、热性和传染性疾病。仅发生于猪和野猪，发病率和死亡率几乎达100％，是尚未传入我国的重要烈性病。自1921年在非洲东部国家肯尼亚首次发现该病以来，ASF不断蔓延传播，给传入国造成了巨大的经济损失。ASF被世界动物卫生组织(OIE)列为必须通报的烈性传染病，在我国动物疫病病种名录中被列为“一类动物疫病”。而且目前尚无有效的针对ASF的商品化疫苗。　　对于ASF疫苗的研究国外已有很多报道，但灭活苗、弱毒苗、亚单位疫苗等传统疫苗均不能提供有效的免疫保护。近期的研究表明，体液免疫无法对ASF感染的猪产生有效的免疫保护，只能延缓病情发作，而CD8+T介导的细胞免疫在抵抗ASFV感染中发挥关键作用，清除猪体内的CD8+T细胞后疫苗完全失去保护效力。因此，在ASF疫苗的研制中，急需探寻一种能有效激活T细胞免疫应答的免疫方式。CD8+T识别由抗原递呈细胞MHC-Ⅰ分子递呈的抗原多肽，因此本研究目标在于筛选能够诱发细胞免疫的ASFV抗原MHC-Ⅰ限制性短肽以及疫苗载体。　　ASFV的蛋白p72、p54、p30和CD2v是4种很重要的抗原蛋白。p72蛋白是病毒粒子的主要结构蛋白。p54蛋白是病毒早期感染及病毒生存所必需的一种蛋白，可能介导病毒的吸附和侵入细胞过程。p30是磷蛋白，参与ASFV吸附易感细胞。CD2v蛋白与宿主细胞CD2蛋白相似，在红细胞结合感染细胞和胞外病毒粒子过程中是必需的，吸附到红细胞表面的特性与ASFV在易感动物体内扩散有重要关系。有研究表明，针对p72、p54、p30、CD2v的DNA疫苗可以诱导机体产生针对ASFV的细胞免疫应答，对ASFV感染产生部分保护力。　　本研究构建和拯救了表达ASFV p72、p54、p30和CD2v蛋白的重组DNA载体、重组新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)和重组痘苗病毒(Vaccinia virus，VV)，并对黑龙江现地猪进行免疫评价，以找出能有效增强针对ASFV细胞免疫的免疫方式。通过对比不同实验组使用不同疫苗组合免疫后ELISPOT的数据，结果显示以重组DNA初免、两次重组痘苗病毒加强免疫能更有效的诱发猪的细胞免疫应答。同时，对实验动物猪的SLA-Ⅰ进行分类，将之与ELISPOT的实验结果相联系，得到了实验所用4种蛋白中能诱发具有不同SLA-Ⅰ背景猪细胞免疫反应的多肽组合。本研究对防制ASF的疫苗进行了探索，得到的疫苗组合和多肽组合具有发展成为ASF疫苗的潜力。