目的:通过芽管试验、厚壁孢子试验、CHROM显色试验、42℃温度试验、API 20C AUX糖同化试验等表型方法结合RAPD(随机扩增多态性DNA)方法分离和鉴定都柏林念珠菌。建立一种简单、可靠、快速的基因型鉴定方法,调查本院区性病门诊生殖器念珠菌病患者都柏林念珠菌的阳性率。 方法:收集了2002年10月～2006年3月期间到天津市性传播疾病研究所门诊就诊的生殖器念珠菌病患者的700例临床菌株和北京大学真菌和真菌病研究中心馈赠的白念珠菌标准菌株ATCC-11006、都柏林念珠菌标准菌株CBS—8501作为样本,所有临床菌株均经过芽管试验、厚壁孢子试验、CHROM显色试验鉴定为白念珠菌,然后将上述菌株进行42℃温度试验和API 20C AUX试验。温度试验作为初筛试验筛选出108株阳性菌株。然后,将42℃温度试验中生长不良或完全不生长的原菌株在沙氏培养基活化两遍,每次活化24 h～48h。用含有蛋白酶K的裂解液裂解菌细胞,采用传统的酚氯仿抽提,异丙醇沉淀法制备DNA模板。通过RAPD的方法对基因组DNA进行扩增,2%的琼脂糖凝胶电泳紫外线灯下观察带型。 结果:经过三遍温度试验后,108例临床菌株和1例都柏林念珠菌标准株几乎无生长。PCR扩增产物进行2%的琼脂糖凝胶电泳,显示两种截然不同的带型,可以清楚的区分开白念珠菌和都柏林念珠菌。但未在临床标本中筛选出都柏林念珠菌。 结论: 1.生殖器念珠菌病的白念珠菌中,15.4%的菌株在42℃温度试验几乎无生长或生长较差。