【摘 要】
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目的:研究ANXA7和PDIA3在子痫前期和正常孕产妇胎盘组织中表达水平。研究ANXA7和PDIA3表达差异对滋养层HTR-8细胞系的增殖和凋亡的影响及调节的下游通路。方法:收集子痫前期患者和正常妊娠的绒毛样本,使用Realtime-PCR来验证一些筛选的基因在胎盘滋养层细胞的表达水平。使用免疫组化和Western blot检测人PE组和正常组的胎盘组织ANXA7和PDIA3蛋白的表达水平。在绒毛
【基金项目】
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国家重点研发计划项（2018YRFC1002800）； 国家自然科学基金（31671567）； 上海交通大学医工交叉项目（YG2017ZD09）；
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目的:研究ANXA7和PDIA3在子痫前期和正常孕产妇胎盘组织中表达水平。研究ANXA7和PDIA3表达差异对滋养层HTR-8细胞系的增殖和凋亡的影响及调节的下游通路。方法:收集子痫前期患者和正常妊娠的绒毛样本,使用Realtime-PCR来验证一些筛选的基因在胎盘滋养层细胞的表达水平。使用免疫组化和Western blot检测人PE组和正常组的胎盘组织ANXA7和PDIA3蛋白的表达水平。在绒毛滋养层HTR-8细胞系敲减或过表达ANXA7基因以建立体外细胞模型,用流式实验和Western blot检测凋亡标志性蛋白实验来评价细胞的凋亡水平,使用CCK-8、Ed U和细胞免疫荧光检测增殖水平。通过小分子抑制剂和Western blot寻找ANXA7调节的下游通路,并且验证PE胎盘组织的凋亡水平。在HTR-8细胞中敲减或过表达PDIA3,使用流式实验和Western blot实验检测细胞的凋亡,使用CCK-8、Ed U实验检测细胞的增殖能力。使用转录组测序、挽救实验和Western blot寻找并验证PDIA3调节的下游通路。结果:PDIA3、ANXA7的RNA和蛋白表达在子痫前期组较正常组显著性降低。敲减ANXA7后,HTR-8细胞出现凋亡增加、增殖能力减少,过表达ANXA7出现相反趋势。ANXA7可以通过调节JAK1/STAT3/BCL2信号通路来改变HTR-8的增殖和凋亡。在子痫前期胎盘组织存在BCL2/BAX比值减少。低表达PDIA3会引起HTR8细胞的凋亡增加和增殖能力减弱,过表达PDIA3结局相反。PDIA3可以通过调节MDM2/p53通路影响HTR-8的增殖和凋亡。PE产妇的胎盘组织较正常组存在MDM2和p21的表达水平的改变。结论:在子痫前期患者中ANXA7和PDIA3蛋白表达降低。ANXA7可以通过调节JAK1/STAT3/BCL2通路影响HTR-8的增殖和凋亡。PDIA3通过调节MDM2/p53通路来调节滋养层细胞的增殖和凋亡。
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