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目的:Fascin2(Fscn2)是一种肌动蛋白交联蛋白,主要表达于视网膜和毛细胞静纤毛。最近的研究证实Fascin2基因(Fscn2)错义突变(Fascin2p.R109H)可导致DBA/2J小鼠产生早发性的听力受损。为了更全面的研究Fscn2基因的功能,本研究利用 TALEN(transcription activator-like effector nucleases)技术在 C57BL/6J(B6)小鼠背景下敲除Fscn2基因,获得了 4种基因敲除小鼠品系,它们分别是缺失Fscn2目标靶基因1、4、5和41个碱基对(base pair,bp)。在本实验中把携带同样缺失41个bp的F1代杂合型小鼠(Fscn2+/-)配对,使其生育纯合型小鼠(Fscn2-/-)。方法:通过PCR-琼脂糖凝胶电泳鉴别纯合型小鼠(Fscn2-/-)、杂合型小鼠(Fscn2+/-)和野生型小鼠(Fscn2+/+)。通过RT-PCR检测Fscn2基因的转录情况。通过Western blotting检测Fscn2蛋白的表达情况。通过免疫荧光定位Fscn2蛋白在视网膜和耳蜗组织的表达情况。测试3周龄到52周龄的小鼠的听觉脑干反应(auditory brainstem-response,ABR)阈值和畸变产物耳声发射(DistortionProduct Otoacoustic Emission,DPOAE)幅值,动态观察小鼠听力的改变。使用Alexa Fluor-488标记的鬼笔环肽对毛细胞染色来观察毛细胞在3周龄到52周龄的形态改变。与此同时,使用扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观察毛细胞静纤毛的改变。在4、8、16和24周龄时测试小鼠暗适应下的视网膜电图(electroretinogram,ERG),同时观察视网膜形态的改变。结果:纯合型小鼠(Fscn2-/-)表现出渐进性的听力减退,即ABR阈值升高、DPOAE幅值降低。纯合型小鼠(Fscn2-/-)听力受损始于3周龄(尤其是高频听力受损更为显著),听力严重受损出现在24周龄,几乎变为全聋。鬼笔环肽对毛细胞染色和SEM的结果显示纯合型小鼠(Fscn2-/-)伴有毛细胞(静纤毛)早发性、渐进性丢失。除此之外,与野生型小鼠(Fscn2+/+)相比,纯合型小鼠(Fscn2--)出现ERG的波幅幅值降低和视网膜厚度变薄。结论：Fscn2基因敲除可导致C57BL/6J小鼠出现渐进性的听力减退、耳蜗毛细胞(静纤毛)丢失以及视网膜变性;在C57BL/6J小鼠背景下使用TALEN技术成功制备了Fscn2基因无义突变小鼠模型;该小鼠模型(Fscn2-/-A小鼠)将会有助于研究人类FSCN2基因引发的相关疾病。