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目的肾小球足细胞是一种高度分化的终末细胞，相邻两足突之间相互连接形成的裂孔隔膜构成了肾小球最后一道滤过屏障。对乙型肝炎病毒相关性膜性肾病（HBV-MN）的临床病理研究显示患者均存在不同程度的足突融合，提示HBV-MN发生过程中存在裂孔隔膜的异常。与原发性膜性肾病相比，HBV-MN不仅存在补体攻膜复合物对足细胞的损伤，还存在HBV蛋白对足细胞的作用，因此本研究通过构建体外足细胞的亚溶量C5b-9（sC5b-9）模型，利用携带HBx基因的复制缺陷型腺病毒转染足细胞，观察sC5b-9和HBx双重损伤因素对培养足细胞裂孔膜蛋白表达和分布有何影响。方法通过检测细胞培养上清液中的LDH活性，采用“棋盘实验”的方法确定sC5b-9攻击足细胞的抗体和补体浓度，瑞士-吉姆萨染色观察sC5b-9对足细胞形态的影响，间接免疫荧光染色与激光共聚焦显微镜观察足细胞裂孔膜蛋白分布的变化，western-blot检测足细胞裂孔膜蛋白表达量的变化。结果通过LDH的测定确定了sC5b-9模型的抗体浓度为1%，补体浓度为1%。细胞形态学观察显示sC5b-9可以造成足细胞突触减少，胞质轻微空泡变性，胞核肿胀呈颗粒样改变，核膜界限模糊等变化。免疫荧光染色显示sC5b-9和HBx双重作用下裂孔隔膜蛋白分布异常较单因素更显著：nephrin主要朝核周分布聚集，胞质和突起的表达急剧减少；空白组podocin和CD2AP在胞质均匀分布，膜周呈小颗粒状，而双重损伤组呈粗丝状或者大颗粒样分布于膜周和突起。western blot检测显示双重损伤组较sC5b-9单因素损伤组CD2AP、nephrin的表达显著减少，podocin的表达反而升高；与HBx单因素损伤组比较，CD2AP、nephrin和podocin的表达均显著降低。结论sC5b-9和HBx蛋白双重因素可以加重裂孔膜蛋白的损伤。这揭示了在HBV-MN疾病进程中补体攻膜复合物和HBx蛋白可能共同发挥损伤足细胞的作用，损伤的靶点为裂孔膜蛋白，将为HBV-MN的诊疗提供新的思路。