研究目的:1、研究衰老细胞中凋亡抗性升高是否与IAP蛋白相关以及抑制该基因能否诱导衰老细胞的死亡和作用机制 2、研究清除衰老细胞后能否延缓骨性关节炎的进展研究内容:1、研究衰老细胞中凋亡抗性增高与IAP蛋白表达之间的关联2、研究抑制IAP蛋白能否清除衰老细胞及其作用机制 3、研究清除衰老细胞后对其SASP分泌情况以及分化能力的影响以及在大鼠体内清除衰老细胞能否延缓骨性关节炎的进展研究方法:选取SD大鼠提取原代骨髓间充质干细胞（BMSC）,用D-gal及H₂O₂诱导细胞衰老并通过多次传代构建衰老细胞模型,采用流式细胞检测技术、免疫印迹法（Western Blot,WB）以及β半乳糖苷酶染色检测衰老相关指标。WB、实时荧光定量PCR（Quantitative Real-Time PCR,q PCR）以及免疫荧光检测衰老细胞中IAP的表达,再用IAP蛋白抑制剂AT-406及si RNA转染抑制IAP基因的表达观察衰老细胞的存活情况以及通过WB检测凋亡相关蛋白的表达。在抑制IAP蛋白后,用泛半胱天冬酶抑制剂z-VAD-fmk抑制凋亡通路观察衰老细胞的存活情况以及WB检测凋亡相关蛋白的表达。WB和免疫荧光检测衰老细胞中NF-κB通路的激活情况,以及抑制IAP蛋白后JNK通路的变化。慢病毒GFP-m RFP-LC3B感染细胞观察IAP蛋白抑制后自噬过程的变化,WB检测自噬相关蛋白的表达。免疫共沉淀验证XIAP与STX17之间的关系,以及在293T中转染XIAP-Flag和STX17-His验证两者之间的关系。q PCR、WB和ELISA检测衰老细胞中IAP蛋白抑制前后SASP分泌的变化,以及茜素红染色检测成骨分化能力的变化。SD大鼠做ACLT术构建骨关节炎模型,IAP蛋白抑制前后用番红固绿染色观察软骨的变化、免疫组化观察软骨组织衰老和炎症因子的变化、mirco-CT观察软骨下骨的变化以及HE染色检测大鼠体内器官毒副作用。研究结果:衰老细胞中凋亡抗性升高且IAP蛋白表达水平升高、NF-κB通路激活且与IAP蛋白相互作用,抑制IAP蛋白激活JNK通路、阻断自噬小体与溶酶体的融合促进衰老细胞的死亡以及阻断凋亡通路能够部分恢复。抑制IAP蛋白清除衰老细胞减弱SASP的分泌,以及恢复骨髓间充质干细胞的分化能力。SD大鼠体内清除衰老细胞减轻膝关节软骨磨损、减弱软骨下骨的丢失以及减少组织炎症因子的分泌。研究结论:通过抑制IAP蛋白能够诱导衰老细胞的死亡且延缓大鼠体内骨关节炎的进展。