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本研究通过3个试验初步制备了磺胺甲噁唑(SMZ)单克隆抗体免疫检测试剂盒。试验一采用重氮法制备了SMZ完全抗原,并利用已获得的SMZ杂交瘤细胞在小鼠体内诱生扩增抗体,并对产生的单克隆抗体进行鉴定,从而为ELISA检测提供条件;试验二用辣根过氧化物酶标记抗原和单克隆抗体,同时制备SMZ多克隆抗体,比较四种检测SMZ的ELISA方法,从中选出最适的试剂盒检测方法;试验三对选定的试剂盒检测方法进行检测条件的优化,组装SMZ单克隆抗体免疫检测试剂盒,并对其检测的结果进行评估。实验结果表明,SMZ完全抗原偶联成功,SMZ与载体蛋白的结合比为19:1。杂交瘤细胞诱生小鼠腹水的效价为8×10~4;经辛酸-饱和硫酸铵法纯化后蛋白浓度为3.05mg/mL,效价为10~6。制备的标准曲线R~2为0.9956。选择了包被抗原间接竞争法作为试剂盒的检测方法。试剂盒的检测程序为:完全抗原1μg/mL包被酶标板,包被液为CBS,包被条件为4℃包被过夜;封闭液为10%小牛血清,封闭条件为37℃孵育2h;预孵育时间为30min;孵育时间为30min;酶标二抗作用时间30min;底物作用时间为5min;标准抗原的选择梯度为1～10000ng/mL之间。试剂盒的检测范围是10～800ng/mL,最低检测限为10ng/mL,板内和板间变异系数分别3.52%和3.7%,批内为5.78%,其检测不同梯度样品的线性评估结果良好(R~2=0.9774)。因此,本研究组装的试剂盒可以用来检测SMZ,与常规的检测方法相比,该检测方法省时、省力且准确度高。