【摘 要】
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耐高温α-淀粉酶具有出色的耐热性,广泛应用于制糖、发酵、酿造、纺织等工业,是一种重要的工业酶制剂。本论文对地衣芽孢杆菌BL-H19的耐高温α-淀粉酶发酵工艺进行研究与优化
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耐高温α-淀粉酶具有出色的耐热性,广泛应用于制糖、发酵、酿造、纺织等工业,是一种重要的工业酶制剂。本论文对地衣芽孢杆菌BL-H19的耐高温α-淀粉酶发酵工艺进行研究与优化,提高发酵生产水平。本文对菌株BL-H19进行了菌株形态、生理生化鉴定,并确定摇瓶种子培养的最佳条件。绘制了菌株生长曲线和产酶曲线,其产酶为滞后型,所产耐高温α-淀粉酶的最适温度为86℃,最适pH为7.0。以单因素法和响应面法对菌株发酵培养条件进行研究,培养基组成为:黄豆饼粉2.6%,棉籽粉2.1%,硫酸铵0.5%,液化淀粉12.0%(DE值为24± 1),蔗糖5.3%,玉米浆3.0%,氯化钙0.045%,磷酸氢二钾1.4%,磷酸二氢钾0.6%,柠檬酸钠0.2%,pH约为6.5。培养条件为:接种量4%,装液量50mL/250mL,摇床转速260r/min,培养温度为40 ℃。7天发酵酶活为4393 u/mL,是优化前的2.02倍。对10 L发酵罐的培养工艺和补料工艺进行了研究,最佳工艺为:一级种子扩培培养24 h后,以10%的接种量接入发酵罐培养;发酵控制过程分为生长和发酵两个阶段。0h~48h培养温度38 ℃,以自动补氨法控制pH在6.5左右,控制DO值在30~35,控制泡沫。48 h~102 h培养温度40 ℃,控制DO值在30~50。在发酵60h~96h以7.5mL/min恒速流加液化淀粉,控制总糖浓度在1.6%~1.9%,还原糖浓度在0.9%~1.3%,pH值保持平稳。102 h放罐,酶活为10373 u/mL,是优化前的2.07倍,产量是优化前的2.35倍,发酵周期缩短了 15%。
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