中药厚朴质量评价方法研究

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厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils.)为木兰科植物厚朴的干燥干皮、根皮和枝皮,作为常用中药已收载于2005年版《中国药典》一部。本研究收集了不同产地的19个厚朴样品,对厚朴酚、和厚朴酚和厚朴碱3个有效成分进行了分离提取和结构鉴定,并以此为指标性成分建立了HPLC含量测定方法,采用GC-MS法鉴定了厚朴挥发油中的化学成分,建立了厚朴挥发油GC指纹图谱,系统地研究了厚朴的质量评价方法。 1 采用95%乙醇提取药材三次,浓缩提取液得浸膏,盐酸处理浸膏得酸不溶物,酸不溶物进行硅胶柱层析,收集含有酚性成分的馏分,利用制备液相进一步分离得厚朴酚与和厚朴酚。HPLC面积归一化法测得纯度分别为99.6%和98.7%。 2 采用95%乙醇提取药材三次,浓缩提取液得浸膏,盐酸处理浸膏,酸溶液经氨水碱化后,依次用氯仿、正丁醇萃取,正丁醇层经中性氧化铝柱用95%乙醇洗脱,收集对生物碱试剂呈阳性的馏分,用沉淀剂苦味酸沉淀馏分,得黄色沉淀厚朴碱苦味酸盐。加入盐酸,萃取除去苦味酸制得厚朴碱盐酸盐。HPLC面积归一化法测得纯度为98.6%。 3 建立了高效液相色谱法同时测定药材中厚朴酚、和厚朴酚含量的方法。色谱柱Lichrospher C18(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇—水—冰醋酸(80:20:1v/v)为流动相,检测波长292nm。厚朴酚与和厚朴酚的线性范围分别为8.15~97.8μg·mL-1(r=0.9996);8.5~102μg·mL-1(r=0.9997)。平均回收率分别为:97.5%(RSD=1.9%);95.5%(RSD=1.7%)。结果表明,该方法简便、快速准确,重复性好,为药材和相关制剂的质量控制提供了依据。 4 建立了高效液相色谱法测定药材中厚朴碱含量的方法。以甲醇-水-三乙胺(50:50:0.2 v/v)为流动相(磷酸调节pH至3.5),流速0.8mL·min-1,检测波长282nm进行厚朴碱的含量测定。线性范围为12.5-200.0μg·mL-1(r=0.9992);平均回收率98.5%;RSD 1.4%。结果表明,该法简便、快速准确,重复性好,可以应用此法控制厚朴碱含量。 5 采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,对厚朴的挥发油进行了化学成分研究。结果表明挥发油中含有31种成分,其中鉴定出27种化合物。其中主要成分为β-桉叶醇(约占25%)和α-桉叶醇(约占10%)。 6 采用气相色谱法,对厚朴的挥发油进行了指纹图谱研究,共获得了22个色谱峰。对色谱峰相对峰面积进行聚类分析,根据分类结果将厚朴分为2类,其中Ⅰ类为推荐品,Ⅱ类为非推荐药材。取Ⅰ类中8批药材,建立共有模式,分别采用相关系数、夹角余弦和
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