周围神经损伤对骺板发育影响的实验研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:airingyuan
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目的:脊椎动物骨骼的形态与大小因功能各异而相差悬殊,但多数骨骼却是以相同的生长方式-软骨内成骨-长成的。位于长骨骨骺与干骺端之间的骺板(epiphyseal plate)不断增生、增厚,间质发生钙化,软骨细胞凋亡,继而新骨沉积,形成骨干的纵向生长。骺板发育的生理活动和生物学行为复杂,受多方面因素的影响,近年来,众多学者在骺板直接损伤及某些种微量元素缺乏对骺板发育影响方面进行了大量的科学研究,并取得了一定的成果,但在周围神经损伤对骺板发育方面的研究很少。本研究通过建立坐骨神经、股神经损伤的动物模型及应用多种物理检查、影像学检查及镜下观察的方法比较实验组和对照组之间骺板发育情况的差异,探讨周围神经损伤对骺板发育的影响及作用机制,从而为临床上更加合理有效的治疗幼儿及青少年周围神经损伤提供理论依据。方法:选用健康的6~8周龄中国大耳白家兔40只,雌雄不限,体重1.0~1.4kg。采用同体对照法,将左侧股神经、坐骨神经切除1cm作为实验组,右侧不切除股神经、坐骨神经作为对照组。采取20mg/kg的复方氯胺酮注射液肌肉注射麻醉成功后,常规备皮消毒,将幼兔以俯卧位固定于兔台上,于幼兔左侧臀部后外侧设计长约2.5cm的斜形切口,切开皮肤及皮下组织,钝性分离显露臀大肌深部的坐骨神经,在梨状肌下缘下约1cm范围内仔细游离,于梨状肌下缘下约0.5cm处横行切断并切除坐骨神经远段约1cm,盐水冲洗伤口后,术野滴入庆大霉素注射液0.4ml,预防感染。4-0丝线分别缝合肌层和皮肤,创面覆盖敷料。将幼兔改换仰卧位固定于兔台上,重新消毒铺单,于幼兔左下肢腹股沟处沿腹股沟韧带下缘设计长约2.0cm的切口,切开皮肤及皮下组织,显露位于股动脉外侧的股神经,于腹股沟韧带下约0.5cm处横行切断并切除股神经远段约1cm,盐水冲洗伤口后,术野滴入庆大霉素注射液0.4ml,预防感染。4-0丝线分别缝合肌层和皮肤,创面覆盖敷料。术后将所有实验动物置于笼内喂养,注意保温,术后连续三天肌肉注射青霉素1万单位/kg体重,每日三次,并应用碘伏隔日消毒伤口,预防伤口感染。动物饲养选用标准饲料喂养。将实验动物分别在术后2、4、8、12周各时间点分别处死10只,进行观察:实验动物处死前行X线摄像,观察实验动物X线下双侧胫骨的变化,测量双侧胫骨角及胫后角并进行对比;处死实验动物后,去除膝关节、踝关节周围附着的肌肉及关节囊,保留完整的胫骨,游标卡尺测量双侧胫骨的长度并进行对比,将胫骨近端包括胫骨关节面、骨骺、骺板及干骺端一同取出分别行光镜检查,观察骺板软骨细胞的增殖、分化情况,并对各组数据进行统计学分析。结果:1影像学检查分别于胫骨正、侧位X线片下,测量胫骨角、胫后角,实验结果表明,各时期实验组与对照组结果均有显著性差异(P<0.01),实验组的胫骨角及胫后角明显小于对照组,术后12周实验组与对照组的胫骨角分别为74.24±0.38°、85.73±0.55°,胫后角分别为6.95±0.41°、15.67±0.39°,说明周围神经损伤影响了骺板的正常发育,导致了骨骼发育畸形。2胫骨长度测量游标卡尺测量双侧胫骨的长度,实验结果表明,各时期实验组与对照组均有显著性差异(P<0.01),实验组胫骨长度较对照组明显短小,术后12周实验组与对照组的胫骨长度分别为107.38±1.46mm、110.62±1.82mm,说明周围神经损伤影响骺板的发育速度,导致骨骼生长速度减慢。3骺板组织学检查光镜下,各时期对照组的骺板软骨细胞增殖分化明显,结构层次清楚,骺板静止层细胞细小而密集,增殖层细胞体积较静止层细胞大,形状扁而不规则,依长骨的轴向堆叠成栅状,肥大层的空泡细胞呈柱状排列。而实验组骺板软骨细胞增殖分化不明显,结构层次不清楚,静止层相对扩大,增殖肥大层相对变小。结论:1周围神经系统与骺板发育关系密切,周围神经损伤可引起骺板发育速度减慢,导致肢体短小、弯曲;2对幼儿及青少年周围神经损伤,应尽早修复周围神经,恢复肢体的神经支配,将周围神经损伤对骺板发育的影响降至最低限度。
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