农作物病毒病害是仅次于真菌病害的第二大类病害,对其防治非常困难。药剂防治是植物病毒病防治的一个重要方面,不同种药剂对不同植物病毒的作用机理和防治效果不尽相同,甚至同种药剂在不同地区气候条件下效果都会有差异。因此需要在大面积推广之前进行田间药效试验。在大田试验中测定药剂的抗病毒效果,工作量大,而实验室中传统的半叶枯斑法需要接种到病毒枯斑寄主,耗时长,能否在实验室中探索一种药剂药效的快速评价方法呢?这一问题值得进行探索。另外,植物病毒在自然界存在着频繁的变异,长期使用同种药剂能否引起病毒变异,来逃避或抵御病毒抑制剂的胁迫。本文对上述问题做了初步探索研究。在中国烟草公司推荐使用的植物病毒抑制剂中选取0.5%氨基寡糖水剂、24%混脂·硫酸铜水剂、20%吗啉胍·乙酸铜可湿性粉剂3种药剂在湖南郴州烟区进行药剂的预防效果和治疗效果分析。结果显示,0.5%氨基寡糖水剂、24%混脂·硫酸铜水剂对烟草花叶病平均预防效果分别为81.12%、81.13%,平均治疗效果分别为62.08%、71.74%。而20%吗啉胍·乙酸铜在该地区对烟草花叶病的防治效果较差,平均预防效果为56.14%,而平均治疗效果只有19.66%。因此建议前2种药剂在该地区大田生产中轮换使用。为了能快速筛选和评价植物病毒抑制剂对病毒的效果,我们利用农杆菌介导的PVX-GFP侵染性克隆侵染云烟,并用抗病毒药剂0.5%氨基寡糖水剂处理注射叶片,2d后利用UV灯照射观察PVX-GFP在叶片中的移动情况,拍照记录测量并统计荧光斑的大小,并利用摩擦接种法观察对比。结果表明,药剂处理后叶片中荧光斑扩散速率小于清水对照叶片,为初步建立药剂药效的快速评价体系提供思路。香菇多糖及毒氟磷是防治植物病毒病的高效药剂,前者能够对病毒的增殖过程产生抑制作用,阻止病毒的复制,后者可以提高植物本身抗性从而抑制病毒扩散。我们汁液摩擦接种法将PVX接种到健康烟草中,并利用上述两种药剂分别连续8个月8次处理侵染后的感病烟苗,设计PVX的RdRp及CP区域引物,用RT-PCR法将第3、5、8次处理后病毒的复制酶及外壳蛋白区域基因克隆测序,与初始序列比对变异情况。结果发现两种药剂胁迫后的CP序列与对照相比,未见氨基酸变异。而药剂胁迫后的复制酶区域均出现一个氨基酸变异,但变异位点不同。本研究为郴州烟区筛选出了对烟草花叶病防治效果较好的植物病毒抑制剂,0.5%氨基寡糖素和24%混脂·硫酸铜。并且在实验室中初步建立了一个植物病毒抑制剂的快速评价体系,为快速筛选和评价植物病毒抑制剂提供了一种新的思路。利用香菇多糖及毒氟磷多代处理感病烟苗,比对PVX复制酶及外壳蛋白基因序列变异情况,得知复制酶及外壳蛋白区域基因发生的变化情况,并对产生这一现象的原因进行了讨论分析。