【摘 要】
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目的本课题旨在研究多西紫杉醇对人胃腺癌(MKN-45)细胞的生长抑制作用及诱导人胃腺癌细胞凋亡作用,并对其诱导凋亡的机制作初步的研究.方法常规培养人胃腺癌MKN-45细胞株,采
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目的本课题旨在研究多西紫杉醇对人胃腺癌(MKN-45)细胞的生长抑制作用及诱导人胃腺癌细胞凋亡作用,并对其诱导凋亡的机制作初步的研究.方法常规培养人胃腺癌MKN-45细胞株,采用MTT法(四甲基偶氮唑蓝比色法)测定细胞增殖抑制率;流式细胞(FCM Flow Cytometry)技术检测细胞周期分布和凋亡率;应用电镜观察细胞凋亡的形态特点;采用荧光光度检测法测定细胞内Caspases(cysteinyl-aspartic-acid-proteases)酶的活性.结果1.多西紫杉醇在1.25ug/ml-80ug/ml浓度范围内对MKN-45细胞株有抑制增殖作用,并且与药物浓度呈正相关.2.终浓度为20ug/ml的多西紫杉醇作用于MKN-45细胞3小时和6小时,流式细胞检测未见有凋亡峰的出现,作用8小时有凋亡峰的出现,12小时凋亡率接近50％.3.以20ug/ml的多西紫杉醇诱导MKN-45细胞凋亡3小时和6小时与未加药的对照组比较,可见MKN-45细胞周期被阻滞在G2/M期,S期比例减少.4.多西紫杉醇10ug/ml作用MKN-45细胞24小时,流式细胞检测未见有明显的凋亡峰的出现.5.在凋亡的形态学检测时发现,浓度为20ug/ml的多西紫杉醇作用MKN-45细胞12小时,可见典型的凋亡形态学改变.6.多西紫杉醇浓度在5ug/ml-80ug/ml范围内作用MKN-45细胞,10小时可诱导Caspases转变为活性状态,且Caspases的活性与干预的药物浓度成正相关.结论新一代的紫杉类抗癌药物多西紫杉醇可以抑制人胃腺癌MKN-45细胞增殖,诱导MKN-45细胞凋亡,诱导Caspases酶由失活状态转变为活化状态.
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