2型糖尿病肾病中医证候与外周血中Ang-1、Ang-2、AnnexinA2基因表达水平的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:wangxingchuang
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目的:探讨2型糖尿病肾病中医证候与外周血中Ang-1、Ang-2、AnnexinA2基因表达水平的研究。糖尿病肾病是糖尿病微血管并发症之一,其发病机制的研究发现,多种细胞因子参与DN的发生发展,目前研究较多的Ang-1、Ang-2被认为在DN血管生成过程中起十分重要的作用,然而对于AnnexinA2的研究很少,但是AnnexinA2是否影响糖尿病肾病的异常血管新生?如何介导DN发展?这些问题尙有待研究解决。鉴于此,开展AnnexinA2及其血管新生相关细胞因子的调控机制的研究对于证实DN的发病机制具有非常重要的意义。方法:按照统一的诊断及排除标准,纳入符合标准的病例,共采集108例纳入研究的外周血标本(其中包括40例2型糖尿病肾病患者、38例2型糖尿病患者、30例健康对照组),本实验通过对提供的108份血液样本中提取RNA并反转成cDNA,通过相对荧光定量PCR(染料法)对Ang-1、Ang-2、AnnexinA2的基因表达情况进行分析。按照设计的中医证候调查问卷,收集患者的一般资料,包括姓名、性别、年龄、病程、BMI、并发症、合并症等资料,对40例DN患者进行中医证候调查并进行辨证分析,研究DN不同中医证候中3个目的基因的表达情况。结果:所纳入的全部病例中,在性别、年龄、BMI、病程、并发症、伴发其它内科疾病等一般资料经统计学分析无明显差别,临床具有可比性。其中肝肾气阴两虚证多于脾肾阳虚证患者,同时兼夹证中血瘀证多于湿热证,肝肾气阴两虚证兼夹血瘀证及湿热证均较脾肾阳虚证多;并发症以糖尿病视网膜病变(95%)及坏疽(77.5%)的发生几率高,同时合并高血压(92.5%)、血脂异常(82.5%)、脑血管病变(65%)的几率较高。应用荧光定量PCR方法检测全部纳入的108例外周血中的3个目的基因(Ang-1、Ang-2、AnnexinA2)的表达情况进行统计学分析,结果显示3个目的基因在DN组、DM组、健康对照组中均有表达,DN组的平均表达量高于DM组及健康对照组,且经方差分析P<0.05,差异具有统计学意义;3个目的基因在入选40例DN中医证候两主证中表达是有差别的,脾肾阳虚证组的平均表达量高于肝肾气阴两虚证组,且经t检验,P<0.05,差异具有统计学意义;3个目的基因在DN中医证候两兼夹证中均有表达,但经统计学检验,差异不具有统计学意义。结论:1.2型糖尿病肾病中医证型主证以肝肾气阴两虚、脾肾阳虚居多,兼证以血瘀证、湿热证居多。2.3目的基因呈“S”型的扩增曲线,Ct值落在准确的定量范围内,结果可靠,溶解曲线出现溶解单峰,扩增特异性强。3.在DN组、DM组、健康对照组中均有表达,且DN组的平均表达量高于DM组及健康对照组;3个目的基因在中医证候两主证中均有表达,且脾肾阳虚组高于肝肾气阴两虚组;3个目的基因的在中医证候两兼证中均有表达;一定程度上说明3个目的基因在2型糖尿病肾病患者的血液中存在表达,且不同DN中医证候中表达是有差异的,随着DN进程的影响,3目的基因的平均表达水平也有变化,同时基因表达水平的变化反过来对DN的发生发展,尤其是对DN异常血管生成的发生、发展起重要作用。
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