海洋石油降解菌的分离鉴定及其在海洋石油污染生物修复中的应用研究

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由于全球性广泛的石油生产、运输、使用和处置,在许多环境特别是海洋环境中,石油污染已经成为一个普遍而严重的问题。目前,我国沿海地区海水含油量已超过国家规定的海水水质标准2~8倍。本文以原油或柴油为唯一碳源从厦门近海表层海水样品中通过富集筛选得到了2组降解菌群。从柴油富集物中分离得到了2株细菌,经16SrDNA鉴定分别属于假单胞菌属(Pseudomonas pseudoalcaligenes,97%)和食烷菌属(Alcanivorax dieselolei,99%)。从原油富集物中分离得到了7株细菌,经16SrDNA鉴定,分别属于不动杆菌属(Acinetobacter radioresistens,99%)、生丝单孢菌属(Hyphomonas johnsonii,99%)、食烷菌属(Alcanivorax borkumensis,99%)、根瘤菌属(Mesorhizobium loti,96%)、赤细菌属(Erythrobacter flavus,93.58%)、玫瑰杆菌属(Roseobacter gallaeciensis, 95.81%)和希瓦氏菌属(Shewanella aquimarina, 99%)。其中, GY-2和Y-2与赤细菌属和玫瑰杆菌属已报到的其它种的16SrDNA同源性最高,但也仅为93.58%和95.81%。GY-2能产H2S;能利用萘、蒽、菲等多环芳烃作为生长的唯一碳源;对青霉素敏感;除含有赤细菌属的主要脂肪酸C18:1ω7c外还含有脂肪酸C16:0;G+C含量为62.0~62.2%,实验结果表明GY-2是属于赤细菌属的一个新种,命名为芳烃赤细菌(Erythrobacter aromatiphilus)。Y-2能在37℃生长;有将硝酸盐还原成亚硝酸盐的能力;除含有玫瑰杆菌属共有的主要脂肪酸C18:1外,还含有C18:0和C16:0两种主要脂肪酸;G+C含量为62.4%,实验结果表明Y-2是属于玫瑰杆菌属的一个新种,命名为厦门玫瑰杆菌(Roseobacter xiamengensis)。通过对分离得到的单菌的功能进行研究,选取了实验室保藏的6株柴油降解菌构建了一个柴油降解菌群。通过柴油降解率的测定、残油组分的GC-MS检测分析和菌群结构变化的PCR-DGGE检测对该混合菌群进行了优化,最终得到一组含有2HE-4、PN3-2和B-5三株细菌的柴油降解菌群,其对柴油的降解率为55.9%。此外,选取了AS-3、Y-1、AY-2、Y-2、GY-2、OY-1、AS-5、PN3-2、3C-9和B-5十株细菌,构建了组合1(AS-3、Y-1、AY-2、Y-2、GY-2、OY-1、
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