同源四倍体兰州百合和细叶百合离体再生及对模拟非生物胁迫耐性的研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ruyudeishui
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多倍化对提高花卉品质及增强植物抗性具有重要意义。兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)和细叶百合(Lilium pumilum DC.Fisch.)兼备极高的观赏、食用及药用等经济价值。课题组前期已获得源于上述两种百合二倍体诱变产生的同源四倍体组培苗。实现百合多倍体新种质在生产实践中的广泛应用,明确其生长特性并获得大量稳定遗传的优良性状材料具有重要意义。本试验以兰州百合和细叶百合的二倍体及其同源四倍体组培苗为试材,研究不同倍性的百合鳞片诱导形成不定芽及体细胞胚的差异,并在离体培养下分别利用不同浓度(0,3,6,9,12%)PEG和(5,10,15,20 mmol·L-1)NaHCO3模拟干旱及盐碱胁迫,探究百合的二倍体与其同源四倍体植株对非生物胁迫响应的差异,以期为筛选优良性状的百合多倍体新种质提供依据。主要研究结果如下:1.两种二倍体和同源四倍体百合再生不定芽及体细胞胚的诱导率均达到91%以上。与二倍体相比,同源四倍体百合鳞片的转绿、出芽以及产生胚性愈伤组织或直接产生体细胞胚的时间显著缩短。同源四倍体鳞片产生的不定芽其鳞茎饱满硕大,产生的体细胞胚形态特征明显清晰,成熟度高,形成的再生植株倍性稳定,移栽成活率高。2.随着PEG胁迫浓度增大,两种不同倍性百合叶片的生长量、相对含水量及气孔大小均逐渐降低,3%-9%PEG处理使植株的最大根长及根鲜重显著增加,而同源四倍体植株的生长量始终优于二倍体。6%PEG胁迫第8 d,二倍体百合叶尖叶缘枯黄,叶片下垂,而四倍体叶片浓绿,植株生长状态良好。6%PEG处理下,两种百合二倍体叶绿素含量明显降低,丙二醛、脯氨酸含量以及SOD活性大幅度上升;而四倍体的生长和生理指标没有显著变化,气孔显著减小并随浓度增加部分关闭。12%PEG胁迫下,四倍体叶片的叶绿素、脯氨酸含量及SOD活性均显著高于二倍体,丙二醛含量显著低于二倍体。3.随着NaHCO3胁迫浓度的增加,两种不同倍性百合植株的生长指标均显著降低,盐碱胁迫抑制了组培苗根系的生长。10 mmol·L-11 NaHCO3胁迫第8 d,二倍体百合叶片大量黄化、萎蔫,碱性盐害指数显著上升,而同源四倍体叶尖微黄,长势良好。10 mmol·L-1NaHCO3胁迫下,四倍体百合植株叶片保持较高的叶绿素含量及相对含水量,气孔孔径显著降低;而二倍体的气孔开放程度大,失水严重。20 mmol·L-11 NaHCO3胁迫下,两种四倍体百合叶片的脯氨酸含量及SOD活性大幅度上升并显著高于二倍体,丙二醛的累积始终低于二倍体。综上分析,相比于二倍体,两种同源四倍体百合诱导植物再生的效率显著提高,并增强了植株对干旱及盐碱胁迫的耐受性。
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