【摘 要】
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本论文首先确定了纳他霉素的检测方法—HPLC法;然后对纳他霉素产生菌发酵性能做了初步研究。对其发酵工艺进行了优化,并根据其合成机制,对其代谢调控进行了初步研究。最后在5L自
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本论文首先确定了纳他霉素的检测方法—HPLC法;然后对纳他霉素产生菌发酵性能做了初步研究。对其发酵工艺进行了优化,并根据其合成机制,对其代谢调控进行了初步研究。最后在5L自动罐上研究了纳他霉素的间歇补料分批发酵。 确定了HPLC法检测发酵液中纳他霉素的各项参数:在Phenomenex prodigy 5μ ODS3 100A(250mm×4.60mm i.d.,5μm)色谱柱上,以甲醇-水-磷酸(体积比85:15:0.15)为流动相,流速为1mL/min,紫外检测波长为303nm。 在研究菌株发酵性能的基础上,优化了发酵培养基配方:葡萄糖36g/L,大豆蛋白胨20g/L,酵母粉4.5g/L,pH7.9。 根据纳他霉素的合成途径,研究了前体物及代谢调节物对发酵的影响。结果表明,亚铁氰化钾和生物素都对纳他霉素的合成无促进作用;在初始培养基中加入0.5%的磷酸镁并在快速生长末期加入0.1%的丙酸钠能提高纳他霉素的产量,使之达到2.79g/L。 以模糊理论为基础,以生长生产耦合度定量表征了菌株生长和生产的同步程度。发现在发酵过程中生长和生产不同步,耦合度仅为4.09%。 在5L机械搅拌发酵罐中进行了控制pH间歇流加培养实验。确定的工艺参数为:pH控制为45h前保持6.5,45h后保持5.5;从第45h开始流加50%葡萄糖,以发酵液中葡萄糖水平为控制指标,维持葡萄糖浓度20g/L;培养时间为93h。最终纳他霉素产量达到2.97g/L。
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