【摘 要】
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本试验以从酸菜发酵培养液中分离出的植物乳杆菌(plant lactobacillus 1.5 57)为研究菌株,对其产生的植物乳杆菌素plantaricin1.557进行分离纯化、理化性质的研究。为了解植
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本试验以从酸菜发酵培养液中分离出的植物乳杆菌(plant lactobacillus 1.5 57)为研究菌株,对其产生的植物乳杆菌素plantaricin1.557进行分离纯化、理化性质的研究。为了解植物乳杆菌素结构与性质的关系提供一定的理论基础。本试验主要通过 Yang 法、DEAE-Sepharose Fast Flow、Sephadex G-50 凝胶过滤层析和制备高效液相色谱法分离纯化植物乳杆菌素。经Sephadex G-50凝胶过滤层析纯化后,植物乳杆菌素比活力为5.81x104AU/mg,样品纯化了 38.7倍,得率1.86%;将植物乳杆菌素进行SDS-PAGE检测,得到植物乳杆菌素的相对分子质量约为9kDa。对植物乳杆菌素进行理化性质的测定。结果表明:该植物乳杆菌素在pH2-pH1 0的条件下处理2h仍有活性,具有良好的耐酸碱性;20℃-100℃处理20min仍有抑菌效果,具有较好的热稳定性;植物乳杆菌素经10%甲醛、乙醇、丙三醇、丙酮处理2h后其抑菌活性几乎无变化;经5mmol/L SDS、EDTA、1%和5%H2O2、Tween-20、Tween-80、Triton X-114处理2h后,植物乳杆菌素仍有抑菌活性;经1mmol/L 金属离子 K+、Na+、Ca2+、Al3+、Pb2+、Hg2+、Mg2+、Cu2+、Fe2+、Zn2+、Mn2+、Ba2+处理2h后,其中Ca2+、K+和Na+对植物乳杆菌素的活性有增强作用,而 Fe3+、Al3+、Pb2+、Hg2+、Mg2+、Ba2+、Zn2+、Fe2+、Mn2+、Cu2+对植物乳杆菌素活性具有抑制作用。该植物乳杆菌素不仅对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)等革兰氏阴性菌有抑菌效果,对志贺氏菌(Shigella)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)等革兰氏阴性菌也有不同程度的抑制作用,抑菌谱较宽。对制备高效液相色谱纯化后的植物乳杆菌素进行结构测定。通过红外光谱检测有酰胺键的存在,再一次印证其化学本质是蛋白质。在1662cm-1有红外吸收峰,说明植物乳杆菌素的二级结构中存在β-转角元件。
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