轮状病毒腹泻婴儿肠道微生态变化的研究

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轮状病毒(rotavirus, RV)感染腹泻是引起世界范围内婴幼儿重症腹泻的主要原因,在发展中国家每年有60万婴幼儿由于RV感染腹泻引起脱水,甚至死亡。该疾病对婴幼儿的健康,生长发育乃至生命都造成严重影响。RV引起腹泻是通过扰乱肠道黏膜细胞的吸收,使得肠道微生态平衡失调,肠道功能发生紊乱而造成的。腹泻导致肠道菌群失调,而菌群失调又诱发或加重腹泻。因此理清腹泻时肠道菌群状况对预防和治疗RV感染腹泻意义深远。本研究通过对婴儿粪便中微生物的分析探讨了RV病毒感染腹泻婴儿肠道微生态的变化,揭示了肠道微生态在婴儿RV感染腹泻疾病中的作用。本试验以2011年1-3月间哈尔滨市儿童医院确诊的15例RV感染腹泻婴儿(RV腹泻组)和15例健康婴儿(对照组)为研究对象,利用试剂盒法提取婴儿粪便DNA,利用调查问卷方式收集婴儿生长发育和患病情况信息,采用细菌的16S rDNA V3区通用引物、乳酸杆菌属专一性引物和双歧杆菌属专一性引物对粪便总DNA进行PCR扩增,扩增产物进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析,利用Quantity One软件对RV感染腹泻婴儿的肠道菌群进行聚类和相似性分析,利用Shannon-Weaver指数对肠道菌群进行生物多样性分析,利用基因测序技术和Quantity One软件对RV感染腹泻婴儿肠道微生物进行定性和定量分析。研究结果表明:RV腹泻组和对照组的肠道优势菌群多样性存在明显差异(P<0.05),且RV腹泻组的多样性低于对照组,表明RV腹泻对肠道菌群多样性存在一定影响。RV腹泻婴儿肠道中拟杆菌属、梭菌属、肠杆菌属、屎肠球菌和大肠杆菌属占优势。与对照组比,乳酸菌属、双歧杆菌属和消化球菌属在RV感染腹泻婴儿的肠道中不占优势,说明RV感染腹泻后婴儿肠道优势菌群的组成发生变化。RV腹泻组和对照组肠道乳酸杆菌属的多样性存在明显差异(P<0.05),且RV腹泻组的多样性低于对照组,表明RV腹泻对乳酸杆菌属的多样性存在一定影响。RV腹泻组乳酸杆菌属的组成为:短乳酸杆菌、植物乳酸杆菌和发酵乳酸杆菌。和对照组相比,嗜热乳酸杆菌和植物乳酸杆菌不是RV腹泻组肠道乳酸杆菌属的优势种,说明RV感染腹泻后婴儿肠道菌种乳酸杆菌属的组成发生了变化。RV腹泻组和对照组肠道双歧杆菌属的多样性存在明显差异(P<0.05),且RV腹泻组的多样性低于对照组,表明RV腹泻对双歧杆菌属的多样性存在一定影响。RV腹泻组双歧杆菌属的组成为:短双歧杆菌和青春双歧杆菌。和对照组相比,婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌和短双歧杆菌不是RV腹泻组肠道双歧杆菌属的优势种,说明RV感染腹泻后婴儿肠道菌种双歧杆菌属的组成发生了变化。
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