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目的:牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)作为一种关键的牙周致病菌,被认为是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成的促进因素之一。我们前期研究发现P.gingivalis通过上调血管内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)的分泌,促进细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecules-1,ICAM-1)的表达及单核-内皮细胞的黏附,且MIF的受体CD74和CXCR4均影响ICAM-1表达和单核-内皮细胞黏附。提示MIF可能通过与受体CD74或CXCR4结合而参与P.gingivalis增强血管内皮细胞黏附活性的细胞内信号传导。本研究拟进一步探索CD74和CXCR4与MIF之间的相互作用关系及P.gingivalis、CXCR4对血管内皮细胞生物学特性的影响,旨在阐明P.gingivalis感染增加内皮细胞黏附活性的机制,探讨P.gingivalis影响AS发生的可能途径。方法:细胞免疫荧光染色法检测P.gingivalis感染后,CD74和CXCR4在EA.hy926细胞表面的定位。采用质粒转染技术构建CXCR4-shRNA(CXCR4i)稳定细胞株,免疫共沉淀法分析P.gingivalis感染的EA.hy926细胞中MIF、CD74、CXCR4之间的表达关系。分别利用CCK-8法和流式细胞术探讨P.gingivalis感染及CXCR4沉默对EA.hy926细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。结果:1、细胞免疫荧光染色结果显示P.gingivalis感染后,CD74和CXCR4在EA.hy926细胞表面存在共定位。2、免疫共沉淀实验证实P.gingivalis感染后,EA.hy926细胞中MIF通过与CD74/CXCR4复合体结合,调控内皮细胞的黏附活性。3、P.gingivalis感染、CXCR4沉默均能抑制EA.hy926细胞的增殖(P﹤0.05)、阻滞细胞周期于G0-G1期(P﹤0.05),并促进细胞凋亡(P﹤0.05)。结论:1、P.gingivalis感染通过MIF-CD74/CXCR4配体-受体复合物途径上调EA.hy926细胞黏附活性,MIF-CD74/CXCR4复合体在P.gingivalis影响AS形成中发挥重要作用。2、P.gingivalis可能通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡途径破坏血管内皮的完整性并抑制血管内皮细胞的修复能力,在启动AS早期细胞行为中发挥致病作用。3、CXCR4沉默后细胞增殖减少、凋亡增加,提示CXCR4可能在血管内皮细胞再生、修复方面发挥保护作用。