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目的:通过对骨关节结核病人外周静脉血进行细胞免疫荧光技术、流式细胞技术和RT-PCR(reverse transcription Polymerase Chain Reaction)和实时荧光定量PCR检测巨噬细胞重组人Toll样蛋白相互作用蛋白(Recombinant Human Toll Interacting Protein,Tollip)和Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)含量表达差异,并进行统计学分析。探讨Tollip及TLR4含量表达差异在骨关节结核病人免疫应答中的可能作用机制。方法:选取2017年10月至2019年1月,右江民族医学院附属医院和百色市人民医院收治住院的30例骨关节结核患者(胸椎结核11例,腰椎结核14例,膝关节结核5例);同期选取30例在右江民族医学院附属医院及百色市人民医院体检中心行健康体检的正常人(正常组)。对两组分别采用细胞免疫荧光技术检测Tollip蛋白和TLR4蛋白表达水平;流式细胞技术检测Tollip蛋白和TLR4蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测巨噬细胞的Tollip信使核糖核酸(Messenger RibonucleicAcid,mRNA)和TLR4mRNA含量表达差异。比较两组间含量表达差异。结果:骨关节结核组RT-PCR和实时荧光定量PCR测定TLR4 mRNA和Tollip mRNA结果为:TLR4 mRNA相对表达量平均为21.537±0.823,TLR4ΔCt10.622±1.447,Tollip mRNA相对表达量平均为21.453±1.211,Tollip mRNAΔCt 10.694±1.391。健康体检组为:TLR4 mRNA相对表达量平均为21.457±0.470,TLR4ΔCt为10.617±1.389,Tollip mRNA相对表达量平均为21.573±0.707,Tollip mRNAΔCt 10.452±1.546,算出骨关节结核组与健康体检组的各项值分别为TLR4 average t=0.462、TLR4ΔCt t=0.014、Tollip average t=0.477、TollipΔCt t=0.637.TLR4 average P=0.646、TLR4ΔCt t=0.989、Tollip average t=0.635、Tollip 1ΔCt t=0.527,其P值均>0.05,无统计学意义。骨关节结核组通过流式细胞术检测TLR4蛋白和Tollip蛋白阳性率的均数和加减标准差为:TLR4为1.40±0.63、Tollip 5.38±1.99。健康体检组为:TLR4为0.40±0.26、Tollip 1.40±0.53,TLR4阳性率t为-10.588,Tollip阳性率t为-8.075。TLR4阳性率P值为0.000,Tollip阳性率为0.000,均小于0.05,提示骨关节结核组TLR4蛋白和Tollip蛋白阳性率明显高于健康体检组,有统计学意义P<0.05;骨关节结核组通过细胞免疫荧光技术检测TLR4蛋白、Tollip蛋白表达水平,发现骨关节结核组中TLR4蛋白数量较健康体检组多,同时亮度明显高于健康体检组。骨关节结核组中Tollip蛋白和健康体检组相比数量较多,亮度也较亮。同样还发现骨关节结核组中TLR4蛋白为高亮度红色荧光的巨噬细胞中Tollip蛋白区域蓝色荧光亮度明显较暗,而TLR4蛋白为暗亮度红色荧光的巨噬细胞中Tollip蛋白区域蓝色荧光亮度明显较亮。结论:本研究揭示骨关节结核患者在感染结核后TLR4蛋白和Tollip蛋白表达可增高。本研究初步探讨了骨关节结核患者外周静脉血中巨噬细胞表面TLR4过度异常表达并可能存在Tollip负反馈调控作用的关系,但其具体作用机制尚未明确。