环境雌激素主要是通过激素受体介导调控靶基因转录表达，而产生雌激素类效应。本研究利用雌激素受体、雌激素反应元件和报告基因等，初步建立了一个用于检测环境雌激素的重组酵母系统。 研究主要包括三部分内容： 一、根据唐鱼雌激素受体(TERα)基因cDNA全长序列设计特异性表达引物，应用RT-PCR技术从唐鱼肝脏细胞中扩增得到长约2kb的DNA片段。将其克隆至载体pMD18-T，测序结果表明成功获得完整开放阅读框序列(ORF)，包括1824个核苷酸，编码607个氨基酸，与相应核苷酸序列同源性为99％。将该段DNA亚克隆至原核表达载体构建重组质粒pGADT7/TERα，通过PCR和限制性内切酶鉴定表明该重组质粒构建成功。将该质粒转化酵母细胞，对转化子进行PCR鉴定，发现有唐鱼雌激素受体基因特异条带，说明TERα已重组于酵母细胞中。 二、将人工合成的一段雌激素反应元件(Estrogen Response Element，ERE)插入pMP206载体细胞色素氧化酶基因启动子(CYC1)启动子上游，构建带有雌激素依赖性顺式调控元件ERE及由ERE所调控的报告基因β—半乳糖苷酶基因(LacZ)的雌激素作用报告载体pMP206/ERE。DNA测序发现ERE—CYC1—LacZ框架正确，表明该重组质粒构建成功。 三、将重组质粒pMP206/ERE转化含有质粒pGADT7/TERa的重组酵母菌。对转化子进行PCR鉴定，发现有pMP206/ERE载体的特异条带，说明受雌激素调控的LacZ报告基因已重组于酵母细胞。环境雌激素重组酵母测评系统构建成功。 本研究只是初步建立了一个用于检测环境雌激素的重组酵母系统，还需要进一步的验证实验。