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目的勃起功能障碍(erectile dysfunction, ED)是前列腺癌(prostate cancer)冷冻消融治疗(cryoablation, Cryo)后最常见并发症之一。本研究旨在通过分析Cryo前后勃起功能和一氧化氮合酶(NOS)表达量的变化,初步探讨神经血管束(Neurovascular bundle, NVB)冷冻性损伤对ED的影响,从分子水平探讨前列腺癌冷冻消融导致ED的机制。方法和材料选择雄性成年SD大鼠80只,随机分为对照组、实验组A、实验组B、实验组C。实验组A、实验组B、实验组C分别采用Endocare公司氩氦冷冻系统直径1.7mm冷冻器直视下冷冻大鼠前列腺周围的双侧NVB,温度分别控制在0℃、-40。C、-80℃；对照组只将冷冻器贴近双侧NVB,不开启冷冻系统。各组分别于Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周随机选取5只实验大鼠行阿扑吗啡(APO)试验,观察勃起功能的变化；处死后取大鼠新鲜的阴茎海绵体组织行RT-PCR,检测nNOS-mRNA、eNOS-mRNA的相对表达量,分析各组大鼠NOS的变化趋势；取大鼠福尔马林固定的阴茎海绵体组织行免疫组化,分析nNOS和eNOS的IOD值。结果1对照组、实验组A勃起次数在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异(P>0.05)；实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均显著减少(P<0.001)。2实验组A勃起次数在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异(P>0.05)；实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较对照组显著减少(P<0.001)；实验组C在第4周时勃起次数显著低于实验组B (0.2±0.45Vs.2.0±1.58, P=0.040)。3对照组、实验组A阴茎海绵体nNOS-mRNA相对表达量在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异(P>0.05)；实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均显著降低(P<0.001)。4实验组A阴茎海绵体nNOS-mRNA相对表达量在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异(P>0.05)；实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较对照组显著降低(P<0.001)；实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周时均显著低于实验组B(P<0.001)。5对照组、实验组A阴茎海绵体eNOS-mRNA相对表达量在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异(P>0.05)；与Cryo前相比,实验组B在第4周(1.10±0.078Vs.1.25±0.089,P=0.028)、第9周(0.77±0.050Vs.1.25±0.089,P<0.001)时显著降低；实验组C在第9周较Cryo前显著降低(0.84±0.073Vs.1.19±0.035, P<0.001)。6实验组A阴茎海绵体eNOS-mRNA相对表达量在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异(P>0.05)；实验组B、实验组C在第9周时较对照组显著降低(P<0.001)。7对照组、实验组A阴茎海绵体nNOS IOD值在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异(P>0.05)；实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均显著降低(P<0.001)；实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周均明显低于实验组B(P<0.001)。8实验组A阴茎海绵体nNOS IOD值在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异(P>0.05)；实验组B、实验组C在Cryo后第2周、第4周、第9周较对照组显著降低(P<0.001)。9对照组、实验组A阴茎海绵体eNOS IOD在Cryo后第2周、第4周、第9周较Cryo前均无显著差异(P>0.05)；与Cryo前相比,实验组B在第4周(7.17±0.280Vs.7.93±0.122,P=0.002)、第9周(5.03±0.142Vs.7.93±0.122,P<0.001)时较Cryo前均显著降低；实验组C在第9周较Cryo前显著降低(4.90±0.629Vs.7.82±0.317,P<0.001)。10实验组A阴茎海绵体eNOS IOD在Cryo前、Cryo后第2周、第4周、第9周与对照组均无明显差异(P>0.05)；与对照组相比,第9周时实验组B、实验组C显著降低(P<0.001)。结论1.NVB冷冻损伤是前列腺癌Cryo治疗导致ED的发生机制,且勃起功能随着时间会有所恢复；2.NOS表达量的变化是前列腺癌Cryo治疗导致ED的分子基础；3.冷冻温度是影响前列腺癌Cryo后ED的重要因素,温度越高越有利于勃起功能的恢复。