【摘 要】
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本研究以菲(PHE)为目标污染物,以受污染河流表层沉积物为菌群来源,富集分离出一组新型好氧微生物降解菌群LFH-1,对其微生物群落结构进行了鉴定和降解特性研究。通过对降解菌群进一步筛选,得到一株新型高效PHE降解菌株YM-6,利用16S r RNA技术对YM-6菌株进行鉴定,并通过单因素实验确定了YM-6菌株最佳生长及降解条件,利用气相色谱-质谱法(GC-MS)对菌株降解产物进行鉴定,初步判断YM
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本研究以菲(PHE)为目标污染物,以受污染河流表层沉积物为菌群来源,富集分离出一组新型好氧微生物降解菌群LFH-1,对其微生物群落结构进行了鉴定和降解特性研究。通过对降解菌群进一步筛选,得到一株新型高效PHE降解菌株YM-6,利用16S r RNA技术对YM-6菌株进行鉴定,并通过单因素实验确定了YM-6菌株最佳生长及降解条件,利用气相色谱-质谱法(GC-MS)对菌株降解产物进行鉴定,初步判断YM-6降解PHE的降解途径。最后,选用聚乙烯醇(PVA)和海藻酸钠(SA)为固定化载体,通过包埋-交联的固定化方法将筛选出的PHE高效降解菌株YM-6固定,通过模拟降解实验探究固定化微生物技术实际运用价值,为PAHs原位生物修复提供数据依据及实践经验。研究结果表明:LFH-1菌群主要包括硝基黄杆菌(Diaphorobacter)83.35%,假单胞杆菌属(Pseudomonas)7.46%,反硝化卡斯特兰尼氏菌(Castellaniella)1.67%,水微菌属(Aquamicrobium)1.65%,无色杆菌(Achromobacter)0.68%,嗜麦芽窄食单胞菌属(Stenotrophomonas)0.39%,热单胞菌属(Thermomonas)0.34%,不动杆菌属(Acinetobacter)0.16%,嗜氮根瘤菌属(Azorhizophilus)0.13%。LFH-1菌群在60 h内对PHE(100 mg/L)降解率达到95.78%,有广泛的p H适应范围(p H5-p H11),更适应低温胁迫(20-35℃),可耐受较高盐度(2%)及高浓度污染物(PHE浓度为400 mg/L)。YM-6菌株经初步鉴定为Diaphorobacter sp.,该菌株可在52 h内去除96%的PHE(100 mg/L)。YM-6菌株的最佳生长温度为30℃,适宜高温胁迫(30-40℃)。最适生长p H为7,能承受400 mg/L的PHE,添加邻苯二甲酸可促进YM-6菌株的降解能力,而添加水杨酸和2-萘酚可抑制菌株的生长。YM-6菌株的PHE代谢产物表明,YM-6菌株降解PHE主要通过领苯二甲酸途径,但细节上存在差异:PHE在YM-6菌株的作用下经开环转化为1,2-二氢-苊烯后,一方面进入邻苯二甲酸途径,另一方面直接分解为2-异丙基-5-对甲基苯酚,后转换为β-间苯二酚酸进入TCA(Tricarboxylic Acid Cycle)循环。不同PVA和SA配比实验表明10%PVA+0.5%SA为最佳配合比,所制作固定化小球小球外观质地均匀,微观显示小球表面凹凸不平,疏松多孔,可为微生物吸附及生长提供较多的位点,提供适宜微生物生长的微环境。模拟污染沉积物实验当初始污染物浓度较低时(10 mg/Kg),固定化微生物与游离菌两者降解率差异较小,第14 d内对PHE的去除率分别为88.65%和91.52%。当初始浓度较高时(50 mg/Kg或100 mg/Kg),游离菌难以正常生长,35 d内PHE的自然消解率达到83.51%,固定化微生物对PHE的去除率在35 d达到97.89%。
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