化疗后不同时期胶质瘤组织中应激反应相关基因、热休克蛋白基因和细胞增殖相关基因的表达及其关系的探索性研究

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目的:筛选化疗后不同时期胶质瘤组织中表达发生变化的应激反应相关基因、热休克蛋白相关基因和细胞增殖相关基因,并分析表达发生变化的基因之间的关系。方法:利用人胶质瘤细胞系U251细胞构建裸鼠皮下异位胶质瘤移植模型。通过顺铂对荷瘤裸鼠进行化疗(5mg/(kg.d)腹腔注射2-3天),建立胶质瘤化疗及化疗后复发模型。化疗前取瘤作为对照组胶质瘤,在结束给药的次日取瘤作为化疗结束组胶质瘤;化疗结束后8天左右,胶质瘤较化疗前明显减小但还没开始长大时,取瘤作为最小组胶质瘤;在化疗结束后约14天,肿瘤迅速长大时,取瘤作为复发组胶质瘤。利用SuperArray公司的毒理与药物耐受基因芯片(Catalog No.OHS-401)检测化疗前后不同时期胶质瘤组织中应激、热休克蛋白、细胞增殖三类相关基因的表达变化。应用SPSS11.0统计软件对基因芯片数据进行统计分析。结果:化疗后肿瘤组织中应激反应相关基因、热休克蛋白基因和细胞增殖相关基因的表达出现一系列的改变,有的表达上调,有的表达下调,并且具有时间窗口特征。其中表达出现剧烈变化的有以下基因:(1)ABCC1在化疗后表达逐渐增强;(2)ATM和APC化疗后肿瘤开始减小时表达增强,肿瘤最小时减弱,肿瘤复发后表达增强;(3)HSPA6和FGF2在肿瘤开始减小时表达最低,肿瘤最小组和肿瘤复发组表达逐渐升高;(4)HSPB2在肿瘤开始减小时变化不明显,肿瘤最小时表达上升,肿瘤复发后表达下降;(5)CCND1在肿瘤开始减小时表达迅速上升,肿瘤最小后表达下降,肿瘤复发与肿瘤最小组相比表达变化不大;(6)MT3在化疗后表达逐渐下降,在肿瘤复发后减至最低。经聚类分析及相关性分析发现,这些剧烈改变的基因存在表达的关联。ABCC1与HSPA6,HSPB2,CCND1和FGF2的表达成正相关,与MT3表达成负相关;ATM与HSPA6,CCND1和FGF2表达成正相关,与HSPB2表达成负相关。结论:经顺铂化疗后,胶质瘤组织中应激反应相关基因、热休克蛋白基因、细胞增殖相关基因出现相应表达变化,并且有时间窗口特征。其代表性改变的基因有ABCC1、ATM、HSPA6、HSPB2、APC、CCND1、MT3。胶质瘤组织通过这些基因改变导致顺铂治疗后应激耐受并引发肿瘤复发。
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