中长链脂肪酸甘油三酯的酶法制备及对小鼠脂代谢的影响

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油脂是人类膳食中重要的组成部分,一方面为机体提供能量,另一方面发挥着特殊的健康作用。近年来,过多的摄入脂肪和其他的不良生活习惯会导致肥胖,进而引起一系列的疾病。中长链脂肪酸甘油三酯(Medium-and long-chain triacylglycerols,MLCT)是一类特殊的结构脂质,可以为机体供能的同时避免脂肪堆积。市场上的MLCT大多是以辛癸酸为原料合成的,且没有特定的分子结构。本研究以月桂酸、棕榈硬脂和藻油为原料,酶法合成两种MLM型(Middle-long-middle,MLM)MLCT,分别是富含1,3-二月桂酸-2-棕榈酸甘油三酯(1,3-lauric-2-palmitoylglycerol,LaPLa)和富含月桂酸及二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)的MLCT。并通过动物实验研究富含LaPLa的MLCT对小鼠脂代谢的影响。研究的主要结果如下:(1)富含LaPLa的MLCT酶法制备及理化性质分析:以LaPLa的含量为指标,利用sn-1,3位特异性脂肪酶催化月桂酸酸解棕榈硬脂合成目的产物。比较了三种脂肪酶(RM IM、TL IM、AO IM),AO IM催化效率最高。以AO IM为催化酶,研究了反应温度、酶载量、底物摩尔比、反应时间对LaPLa含量的影响。结果显示在底物摩尔比1:10(棕榈硬脂:月桂酸)、酶载量10%(w/w)、反应温度65℃、水浴振荡器转速200rmp、反应时间2.5 h的条件下,LaPLa的含量可达到(40.59±0.29)%。与棕榈硬脂相比,纯化后的MLCT晶化起始温度和熔融温度均有所降低,酸价和过氧化值均符合食用油标准。(2)富含月桂酸和DHA的MLCT酶法制备及理化性质分析:本研究以月桂酸和藻油为原料,探究了酶催化合成MLM型MLCT的最佳工艺条件。结果表明,以AO IM作为催化剂,在反应温度65℃,底物摩尔比1:8(藻油:月桂酸),酶载量8%(w/w),水浴振荡器转速150 rmp,反应时间2.5 h的条件下,月桂酸的参入率为(28.91±0.14)%,总DHA含量为(44.68±0.07)%,sn-2位月桂酸含量(5.13±0.34)%,sn-2位DHA含量为(52.55±0.39)%,且产物中不含三月桂酸甘油酯(LaLaLa)。纯化后其酸价和过氧化值均符合食用油标准。(3)富含LaPLa的MLCT对小鼠脂代谢的影响:本研究选取60只C57BL/6小鼠随机分为4组,分别利用基础饲料(NCD)、高脂饲料(HFD)、棕榈硬脂替代50%猪油的高脂饲料(PS)以及富含LaPLa的MLCT替代50%猪油的高脂饲料(MLCT),对小鼠进行为期10周的干预。结果表明,在干预第10周,MLCT组小鼠体重较其他3组显著增加,血清中与炎症相关的谷草转氨酶(GOT)与谷丙转氨酶(GPT)的水平显著升高,血脂四项与HFD组和PS组无显著差异。在葡萄糖耐受实验中,MLCT组和HFD组小鼠的血糖变化规律无显著性差异。附睾脂肪切片显示,MLCT组脂肪细胞增大,统计学分析脂肪细胞平均面积与HFD组无显著性差异。综上所述,富含LaPLa的MLCT具有很好的增重作用,特别是较HFD组增重更加显著,同时增重所带来的一些脂代谢指标较HFD组没有发生显著性变化。
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