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油菜菌核病是一种世界性的真菌病害,严重影响着油菜生产,具有土传和气传病害的特点,其病原为Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary。本试验通过对生防放线菌苦胆链霉菌Streptomyces felleus YJ1的诱变选育,以期寻求对油菜菌核病具有较高拮抗活性的突变菌株。同时,探究了出发菌株YJ1及高效突变菌株对油菜菌核病菌的抑制作用,并优化了菌株的发酵条件；测定了拮抗放线菌对油菜抗病相关酶的影响,并进行了室内盆栽、离体叶片及大田防效等试验,为生防菌的进一步开发利用提供了理论依据。其主要研究结果如下：1.生防放线菌YJl的诱变选育利用紫外线、硫酸二乙酯(DES)及二者相结合的复合诱变对生防菌YJ1进行了诱变选育。比较这3种诱变方法的诱变效应,DES是菌株YJ1的最佳诱变剂。通过对突变菌株的摇瓶发酵筛选,最终得到2株对核盘菌菌丝生长抑制活性最大的突变菌株Y-60.16和Y-Y-13,抑菌率分别为89.55%、89.09%,比出发菌株分别提高了11.55%、10.96%。突变菌株Y-60.16、Y-Y-13经连续传代10次,它们对病原菌的抑制活性无明显变化,其遗传稳定性良好。2.生防菌YJl及其突变菌株对油菜菌核病菌的抑制作用生防放线菌YJ1及突变菌株Y-60.16、Y-Y-13对油菜菌核病菌的拮抗带宽分别为11.0 mm、12.3 mm、12.1 mm,其抑菌率分别为80.28%、89.55%、89.09%。这3株放线菌能够明显抑制病菌产生菌核,甚至在病菌培养11d后仍有较高的抑制率,分别为79.05%、81.42%、76.28%。此外,这3株放线菌的无菌发酵液能够抑制病菌菌核和子囊孢子的萌发,但随着发酵液浓度的降低,其抑菌效果有所下降。3.生防菌YJl及其突变菌株发酵条件的优化为了提高生防放线菌YJ1及其突变菌株的发酵水平,经单因素试验和正交试验对它们的发酵条件进行了优化。菌株YJ1的较优发酵培养基组成为：玉米粉10 g,硫酸铵3g,K2HPO4 0.75 g, MgSO4 0.75g, NaCl0.5g, FeSO4 0.01g,蒸馏水1000 mL；理想发酵条件为：初始pH 7.0,发酵温度28℃,发酵时间4 d,摇床转速160 r/min。菌株Y-60.16的发酵培养基：玉米粉20 g,黄豆饼粉3g, K2HPO40.25g, MgSO40.5g, NaCl0.5g, FeSO4 0.01g,蒸馏水1000 mL;理想发酵条件：初始pH 7.0,发酵温度28℃,发酵时间5 d,摇床转速160 r/min.菌株Y-Y-13的发酵培养基：玉米粉20 g,硫酸铵1 g, K2HPO4 0.5 g, MgSO4 0.75 g, NaCl0.5 g, FeSO4 0.01 g,蒸馏水1000mL：理想发酵条件：初始pH 7.0,发酵温度28℃,发酵时间4 d,摇床转速160 r/min。4.生防菌YJl及其突变菌株能提高油菜抗病相关酶的活性生防放线菌YJ1及突变菌株Y-60.16、Y-Y-13能够显著提高油菜SOD、POD、PPO和PAL的活性。这几种酶的变化无明显的数量关系,并且随时间变化的规律也不相同,尤其是在处理4 d后这几种酶的活性都保持在较高水平。由此可知,诱导油菜的系统抗性可能是这几株菌的生防机制之一。5.生防菌YJ1及其突变菌株的防病效果室内试验结果表明,放线菌发酵液用于浸种、灌根或浸根、喷雾以及油菜离体叶片试验,都能够显著控制油菜病菌病斑的扩展。其中,菌株YJ1、Y-60.16和Y-Y-13发酵液喷雾处理的相对防效分别为79.91%、75.00%、80.80%；离体叶片试验的防效分别为81.42%、86.19%、88.52%。在大田试验中,Y-60.16、Y-Y-13的防治效果分别为59.35%、55.89%,高于出发菌YJ1的47.56%,可见这两株放线菌可作为油菜菌核病生物防治的候选菌株。