该文研究了米曲霉β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的过程,包括酶的制备、酶的固定化、酶促合成及产物分离等,为低聚半乳糖的工业化生产奠定基础.对粗酶液进行硫酸铵分级沉淀,结果表明去除杂蛋白的最佳硫酸铵饱和度为40％;沉淀酶蛋白的最佳硫酸铵饱和度为80％.β-半乳糖苷酶的最佳反应温度和最适pH分别为55℃和6.0,该酶具有较好的热稳定性,酶作用于底物乳糖的米氏常数Km和最大反应速度Vmax分别为23.8mmol/L和23.9 μmol/(L.min).通过对酶固定化方法的筛选,选用海藻酸钙对酶进行包埋并加以戊二醛交联,操作简单,酶活力回收率高.用薄层色谱法检测低聚半乳糖糖浆,结果表明以正丙醇:水=85:15为展开剂、苯胺-二苯胺-磷酸为显色剂、0.2 μg/0.5 μ L的点样量时,分离效果较好.通过单因素试验和L<,16>(4<5>)正交试验,确定合成低聚半乳糖的最佳工艺条件:温度55℃、pH6.0、乳糖浓度40％、加酶量40U/g(乳糖)、反应时间32h,水解40％的乳糖,低聚半乳糖的产率达32％.对001×7树脂分离低聚半乳糖的参数进行初步研究,结果表明:温度为60℃、进样量为10mL、洗脱剂流速为3.0mL/min、树脂床高度600mm时能有效去除糖浆中的单糖和二糖,低聚半乳糖的含量可达68％,该法操作简单、价廉、分离效果好,是一种很有前途的分离方法,若进一步改变柱高度,有望得到更理想的效果.