【摘 要】
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水稻生长发育是一个复杂过程,涉及的基因较多,转录因子在其中起着重要作用。水稻SPL基因家族在调控生殖发育、逆境胁迫响应等生理过程中发挥作用。本课题组在籼稻品种R401辐射诱变群体中获得一株苗期耐盐突变体sst,该突变体还表现出“光身”、发芽慢、结实率下降、生育期延长等性状。经遗传分析、定位和功能验证后确定OsSPL10就是SST基因。在此基础上,本研究对SST基因进行了过量表达、亚细胞定位、互作蛋
【基金项目】
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国家自然科学基金项目《水稻SST基因在生长发育及盐胁迫适应中的作用机制研究》(项目编号:31671668); 国家重点研发计划(项目编号:2017YF-D0100100)
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水稻生长发育是一个复杂过程,涉及的基因较多,转录因子在其中起着重要作用。水稻SPL基因家族在调控生殖发育、逆境胁迫响应等生理过程中发挥作用。本课题组在籼稻品种R401辐射诱变群体中获得一株苗期耐盐突变体sst,该突变体还表现出“光身”、发芽慢、结实率下降、生育期延长等性状。经遗传分析、定位和功能验证后确定OsSPL10就是SST基因。在此基础上,本研究对SST基因进行了过量表达、亚细胞定位、互作蛋白筛选、转录组测序等分析,为探究该基因的耐盐机理奠定基础。主要结果如下:(1)构建了OsSPL10基因与GFP的融合表达载体35S::OsSPL10-GFP。利用农杆菌介导侵染烟草叶片并显微观察,结果显示,OsSPL10蛋白在细胞核中特异表达,预测其作为转录因子,在细胞核内起作用。35S::OsSPL10-GFP转基因水稻植株表皮毛数量增加,同时为染色质免疫共沉淀分析做好材料准备。(2)利用酵母双杂交的方法对水稻小穗cDNA文库进行筛选,共得到168个候选互作杂合子,测序分析得53个基因,挑选16个候选基因,利用其全长cDNA酵母双杂交和BIFC验证,共得到2个在酵母和植物中均存在互作的基因,分别为LOCOs03g14140和LOCOs05g02070。(3)通过对R401和sst苗期根的转录组测序分析,一共得到77个差异表达基因。通过对77个差异表达基因的GO和KEGG富集分析发现,大部分基因涉及光合反应过程,推测OsSPL10基因在光合通路中具有作用。
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