一株抗真菌阿南德氏链霉菌及其抗真菌活性产物的初步研究

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近年来,人类和动植物的真菌感染已造成巨大的危害,高效、安全、广谱抗真菌抗生素的研发受到产、学、研各界的广泛关注。放线菌是抗生素的重要来源,本文从土壤中分离筛选抗真菌放线菌,研究其抗真菌抗生素的发酵工艺、理化性质、分离方法。主要内容和结果如下:(1)采用平板稀释分离法从10份土壤样品中分离到105株放线菌。通过平板对峙法和管碟法筛选到一株对真菌具有较强拮抗作用的放线菌JXNU02。实验对放线菌JXNU02的形态特征、细胞壁化学组分、16S rRNA基因序列、培养特征和生理生化特征进行了研究,结果分析表明该菌为阿南德氏链霉菌,记为阿南德氏链霉菌JXNU02(Streptomyces anandii JXNU02)。其发酵液具有广谱的抗菌活性,对所测试的G+和G-细菌、酵母菌及霉菌均具有拮抗作用。(2)通过单因素实验和正交设计实验对放线菌JXNU02摇瓶发酵产抗真菌抗生素的培养基和发酵条件进行了研究,得到适宜发酵培养基配方和发酵条件为:可溶性淀粉10g/L,黄豆饼粉15g/L,KH2PO40.5g/L,MgSO4·7H2O0.1g/L,初始pH7.7,发酵温度30℃,装液量40mL/250mL,接种量6%(V/V),发酵时间144h。(3)对放线菌JXNU02发酵液中抗真菌活性成分的稳定性进行了初步研究,结果表明:活性物质对热、酸和蛋白酶稳定,对碱和紫外光敏感。(4)通过有机溶剂萃取实验,选择水饱和正丁醇为萃取溶剂。采用HP-20大孔吸附树脂吸附后对活性物质进行分离,然后用水饱和正丁醇萃取,正丁醇相浓缩后得抗真菌活性物质粗品。上述研究结果为进一步研发阿南德氏链霉菌抗真菌抗生素奠定了坚实的基础。
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