目的:研究急性缺氧(acute hypoxia)对短期分离培养的SD乳鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGNs)钾通道电流的影响。从听觉神经元信息传递功能变化的角度,为缺氧性内耳损害导致听觉障碍提供进一步的理论依据。方法:(1)短期分离培养SD乳鼠SGNs并鉴定。(2)应用全细胞膜片钳技术观察急性缺氧对SGNs外向电流的作用。(3)分别应用不同的通道阻断剂TEA和4-AP观察急性缺氧对SGNs外向电流的影响。(4)应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测急性缺氧时与钾通道相关的胞内第二信使c AMP和c GMP水平的变化。结果:(1)酶解分离可获得生存状态良好的神经元,经免疫荧光鉴定为SGNs。(2)SGNs外向电流为电压门控外向整流电流,主要包括对TEA敏感的大电导钙激活钾通道(Large conductance Ca2+-activated K+channe,BKCa)电流和对4-AP敏感的电压依赖性钾离子通道(Voltage-gated K+channels,KV)电流。(3)当钳制电压在-60m V时,急性缺氧电压依赖性地增强SGNs外向电流,主要增强0~+60 m V电压区间的激活电流幅度。缺氧致5min时,外向电流幅度增强最大,+60m V电流幅度与对照组基础电流相比由(971.23±50.25)p A增加到(2361±207.4)p A(n=6,P<0.01)。缺氧5-10min时,增强幅度呈下降趋势。缺氧11-15min对外向电流的增强作用基本消失,与正常对照组相比无统计学差异(n=6,P>0.05)。(4)背景灌流TEA(1 mmol/L),缺氧引起的SGNs外向电流增强作用明显降低,灌流4-AP(1 mmol/L)后,对缺氧引起的SGNs外向电流的增强无明显作用。(5)分别检测缺氧5 min,15 min,20 min后SGNs中c AMP和c GMP的含量变化。缺氧5 min组与正常对照组相比,c AMP浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。缺氧15 min组与正常对照组相比,c AMP浓度变化无统计学差异(P>0.05);缺氧20 min组与正常组相比,c AMP水平下降(P<0.01)。c GMP浓度随着缺氧时间的延长,总体呈下降趋势(P<0.01),但在20 min后有部分回升(P<0.01,缺氧15 min vs缺氧20 min)。结论:SD乳鼠SGNs急性缺氧可能通过激活大电导钙激活钾通道(BKCa),增强K+外向电流,使神经元膜电位超极化,细胞兴奋性降低,从而影响SGNs传导功能。该变化可能与细胞内第二信使c AMP和c GMP相关。