慢性应激对Wistar大鼠牙周组织影响的实验研究

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牙周病(periodontal disease)是人类最常见的口腔疾病之一,对口腔健康有很大的危害,是导致牙齿缺失的主要原因之一。众所周知,微生物是牙周病的始动因素,然而,仅有牙周微生物的存在并不一定导致牙周病的发生,还与机体的防御机制、机体的局部和全身因素有关。应激是牙周病的危险因素之一。应激在牙周病的发生、发展中的作用已经被人们重视。应激可以通过影响免疫系统的功能来降低机体的抵抗力进而容易罹患疾病。慢性应激可以引起机体长久的情绪化心理状态,这些情绪的波动会引起一些有害的口腔习惯,例如吸烟、磨牙症等都会对牙周组织造成损伤,成为牙周病发生的促进因素。细胞粘附分子(cellular adhesion molecule ,CAM)是由细胞合成,是细胞与细胞之间以及细胞与基质之间粘附的重要物质。CAM可以促进白细胞向炎症部位聚集,而且影响T细胞和B细胞的活化和效应,在牙周病的炎症过程中,对免疫细胞的定向移动起了非常重要的作用。细胞粘附分子在牙周病的发生、发展过程起到了很关键的作用。细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule ,ICAM-1)作为细胞粘附分子中免疫球蛋白超家族中的一种,在牙周血管和牙龈上皮中均有表达。随着炎症程度的增加,牙周细胞中表达ICAM-1的量也随之增加,是判断牙周病炎症程度的一项客观指标。通过测定牙周组织中细胞表达ICAM-1的多少,就可以判定牙周炎症程度的强弱。目的探讨慢性应激与牙周病之间的关系及慢性应激在牙周病发生发展过程中的作用。方法1、健康、雄性,鼠龄6w的wistar大鼠20只(山西医科大学实验动物中心提供),按随机分组法分成四组,分别是应激组(A)、结扎+应激组(B)、结扎组(C)、对照组(D),每组五只。用0000的尼龙丝线结扎B、C两组大鼠下颌左侧切牙牙颈部,用1%的白砂糖水和糖水浸泡过的大鼠饲料喂养。对A、B组大鼠在室温下的水浴内进行游泳应激,A组大鼠用自来水和标准大鼠饲料喂养。D组大鼠作为对照组,不做游泳应激和丝线结扎,自来水和标准大鼠饲料喂养。2、8w后测量每组每只大鼠的体重,然后处死动物,截取包括实验牙齿及牙周组织的下颌骨制作苏木素伊红(Hematoxylin esin,HE)染色和ICAM-1免疫组织化学(Immunohisto-chemistry,IHC)染色。所得的实验数据采用spss17.0软件进行处理,用均数±标准差( x_±s)表示。采用t检验比较每两组大鼠数据的统计学差异。结果肉眼观察下,A、D组大鼠下颌左切牙牙龈颜色粉红,牙龈不肿胀,牙周组织正常。B、C组大鼠牙龈颜色暗红,牙龈肿胀,边缘圆钝,质地松软。HE染色显微镜下观察,B、C组大鼠上皮钉突增生,纤维结缔组织水肿,可见中性粒细胞和炎症细胞浸润,A、D组大鼠无上皮钉突,牙周膜排列一致,未见有中性粒细胞及炎症细胞浸润。IHC染色结果显示,B组和C组大鼠牙周组织中表达ICAM-1细胞百分数明显高于A组和D组(p<0.05),B组与C组牙周中ICAM-1的细胞表达没有统计学上的差别,A组与D组相比同样没有统计学上的差别。A组与B组大鼠的平均体重明显低于C组和D组大鼠的平均体重(p<0.05),A组与B组的体重相比没有明显的统计学差别,C组与D组的体重相比同样没有明显的统计学差别。结论牙周微生物是牙周病的始动因子,但是仅有牙周微生物的存在不足以引起牙周病的发生,也不足以解释牙周病的复杂性。在本次实验中单纯的慢性应激没有引起大鼠牙周组织的炎症反应,也没有加重大鼠牙周组织的炎症。慢性应激可能是宿主牙周生态系平衡的一个破坏因素。在分子水平上慢性应激对牙周病的作用机制有待进一步研究。
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