松仁多糖的理化性质及免疫功能研究

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红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc),是主产于中国小兴安岭的珍贵树种。其种仁具有软化血管、降低血脂、胆固醇、甘油三脂及防止衰老的功能,具有广阔的应用开发潜力。本文以红松松仁为原料,利用现代分离分析手段,对松仁多糖的提取工艺、纯化分级、理化性质、结构特征以及免疫活性进行了研究,主要结果如下:1、分别采用水提法、超声波和微波辅助提取法提取多糖,并对这三种提取方法的最佳工艺进行了优化研究,多糖得率分别为6.26%,10.74%和6.01%。超声波和微波辅助提取均明显缩短了提取时间,具有高效、节能的优点。2、松仁多糖粗品(PNPC)除去蛋白质和小分子杂质,得到多糖精品(PNPP),经DEAE-52离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析分离纯化,得到了四个主要级分,分别为PNP1-a,PNP1-b,PNP2-a和PNP3-a,经纸色谱和高效液相色谱鉴定均为均一组分。3、松仁多糖四个级分的分子量分别为1.02×10~5Dal,1.43×10~4Dal,1.10×10~5Dal和1.63×10~5Dal。PNP1-a由鼠李糖和葡萄糖组成,摩尔比为1.00∶2.57;PNP1-b由阿拉伯糖和葡萄糖组成,摩尔比为1.00∶4.03;PNP2-a和PNP3-a均由葡萄糖一种单糖组成。经红外光谱(FTIR)、紫外光谱和核磁共振光谱(NMR)对各组分进行结构分析,确定PNP1-a、PNP1-b、PNP2-a和PNP3-a的组成单糖均为β-吡喃糖。4、松仁多糖各剂量组均能显著增加小鼠免疫器官的重量,对小鼠的细胞免疫功能和单核-巨噬细胞吞噬功能也均有促进作用,其中,中剂量组250mg/kg·d均达到了显著差异水平。此外,松仁多糖各剂量均能促进小鼠两种细胞因子IL-2和IL-6的分泌,这表明多糖可以增强机体的特异性体液免疫应答。
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