目的:　杂色曲霉素（ST）是杂色曲霉、构巢曲霉等真菌产生的毒性代谢产物，也是我国恶性肿瘤高发区居民饮食中的主要污染霉菌毒素之一，对人和动物有明显的致癌性和致突变性。但目前ST的毒性实验多是在体外进行的，诱癌实验所用的杂色曲霉培养物也难以排除其它致癌物的存在。机体是一非常复杂的生物学系统，许多致癌物必须通过机体的代谢才能发挥其致癌作用。同时，机体在消除致癌物的致癌性方面也发挥着重要作用。因此,了解在整体水平上通过饮食途径(经口)给予纯化ST对实验动物的生物学效应十分必要。本研究室在进行长期诱癌动物实验过程中发现ST处理组小鼠有神经系统功能障碍表现，但有关ST对脑组织生物学效应的研究于国内外均未见报道。本研究分析了经口给予ST对小鼠大脑神经元的影响，旨在探讨饮食ST暴露对小鼠脑组织的生物学效应，进而对ST暴露对机体的危险性做出评估。方法:　进行动物实验制造模型，实验分两部分进行。实验Ⅰ：将30只BALB/c小鼠随机分为5组，对照组和不同剂量ST处理组，每组6只，雌雄各3只。处理组分别按ST 3μg/kg、30μg/kg、300μg/kg和3000μg/kg的剂量，溶于0.5ml生理盐水中灌胃。对照组用等量生理盐水代替。<WP=4>灌胃12hr后将小鼠脱颈处死，迅速留取视交叉后缘至大脑脚前缘部分脑组织，从大脑纵裂处平均分为两部分，分别用10%甲醛缓冲液和70%乙醇固定，待制备石蜡切片进行常规HE染色与免疫组织化学染色和单细胞悬液进行细胞凋亡和增殖的FCM检测；实验Ⅱ：将48只BALB/c小鼠随机分对照组和ST处理组，每组24只，雌雄各半。实验组和对照组分别以剂量为3000μg/kg ST溶液0.5ml和等量生理盐水灌胃，方法同前。两组动物分别于灌胃后6 hr、12 hr、24 hr和48 hr各取6只小鼠（雌雄各3只）脱颈处死，立即取脑，待测（同实验I）。石蜡切片制备４张，１张用于常规HE染色进行病理形态学观察分析，其余用于免疫组织化学染色，每例均用免疫组织化学UltraSensitiveTM S-P方法检测c-fos、bcl-2、bax基因的蛋白表达。单细胞悬液进行细胞DNA染色,用于大脑神经元凋亡与增殖的流式细胞定量检测（FCM）。结果:　1.病理形态学观察：HE染色光镜观察可见，对照组小鼠大脑组织未见明显异常，而灌胃小剂量ST（3μg/kg）后12 hr和3000μg/kg ST 后6 hr即可导致小鼠大脑皮质、丘脑、海马区神经元出现一定程度的退行性病变，以海马CA2 区最为显著，表现为部分胞核形状不规则，体积缩小，染色加深，核膜及核仁结构不清，胞浆嗜酸性变，有些可见空泡变化，且随剂量增加和作用时间延长，病变神经元逐渐增多。光镜下对病变较明显的海马CA2区病变神经元进行计数分析,结果表明ST处理组发生病理变化的神经元比例均高于相应对照组，且随着剂量的增加和作用时间的延长，比例逐渐增高（n=6，r=0.718,P<0.01,<WP=5>表1和表2）；　2.c-Fos蛋白免疫组织化学染色：光镜下观察，对照组未见c-Fos蛋白染色阳性产物，ST各处理组均呈阳性表达，以海马区最为密集，下丘脑、杏仁核、皮质部位均有较强表达，随剂量增加表达增强；ST处理后6 hr有（31.34±5.86）%表达，至12hr达到峰值（41.03±4.70）%，之后随时间延长而逐渐减弱：24hr为（30.52±6.60）%，48hr为（19.50±3.21）%；　3.Bcl-2与Bax蛋白免疫组织化学染色：对照组未见阳性染色产物，ST各处理组阳性产物表达于海马、皮质、下丘脑等部位，海马区神经元Bcl-2与Bax蛋白阳性表达率均随ST剂量增加（3~3000μg/kg）而增加， Bcl-2与Bax比值也增加；随作用时间延长（6~48hr）, Bcl-2与Bax蛋白阳性表达率均增高, 但其比值呈下降趋势；　4.流式细胞定量检测：结果表明经口给予不同剂量的ST（3μg/kg,30μg/kg,300μg/kg,3000μg/kg）12 hr，小鼠大脑神经元的凋亡率均明显高于对照组，ST剂量与凋亡率之间存在明显的量效关系（n=6，r=0.693,P<0.01）；灌胃3000μg/kg ST后6~48 hr，随ST作用时间延长，大脑神经元的凋亡率也明显增高（n=6，r=0.618,P<0.01）。另外，ST对大脑细胞的增殖尚有一定影响，但差异无显著的统计学意义。流式细胞仪测定的细胞凋亡率与基因表达变化相一致。结论:　１. 病理形态学观察结果表明经口给予ST可导致小鼠大脑神经元受损，出现一定程度的退行性病变, 表现为部分神经元胞核体积缩小，染色加深，胞浆嗜酸性变，有些可见空泡变化；　2.经口给予ST后，小鼠大脑神经元c-Fos蛋白免疫组织化学染色表达增多，表明ST作为<WP=6>一种毒素，确实可对小鼠脑组织产生伤害性刺激作用；　3. Bcl-2与Bax蛋白免疫组织化学染色结果显示，经口给予ST可使小鼠大脑海马、皮质、下丘脑等部位神经元表达Bcl-2与Bax蛋白增多，与相应对照组比较差异具有显著的统计学意义。Bcl-2与Bax蛋白阳性表达率比值总体呈下降趋势，表明经口给予ST可诱导小鼠大脑神经元走向凋亡；　4.流式细胞定量检测结果表明经口给予ST可诱导、促进小鼠大脑细胞凋亡。