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邻苯二甲酸二(2-乙基-己基)酯(DEHP)作为环境中丰富存在的内分泌干扰物,易于迁入环境,不易被降解,已受到人们的普遍重视。现有实验证明DEHP会造成神经、甲状腺、肾脏、心脏、生殖发育等多方面毒性,与雌性相比雄性生殖系统对DEHP更为敏感。目前为止,已证明DEHP暴露可以造成雄性个体附睾、睾丸、前列腺的湿重显著降低,肛殖距显著减小,并能引发隐睾等多种生殖损伤。其具体损伤机制包括影响雄鼠睾丸DNA甲基化状态、诱导生精细胞发生凋亡、抑制生精细胞增殖、影响雄激素的合成、诱导生精细胞产生DNA损伤等。本实验在ICR小鼠怀孕的第9.5天到第15.5天通过灌胃进行不同浓度的DEHP暴露(75mg/kg/d,225mg/kg/d,675mg/kg/d),分别在F1代雄性小鼠胚胎期第18.5天以及出生后14、28、35天取材,应用HE染色和透射电镜技术,在组织学水平和超微结构水平研究孕期DEHP暴露对F1代雄性胎鼠和青春期小鼠造成的睾丸病理损伤;并进一步应用Western blot、TUNEL检测、免疫组织化学检测等实验方法,从内质网稳态失衡与内质网应激介导的凋亡、细胞增殖和睾酮合成及代谢等方面探究DEHP造成雄性生殖损伤的具体作用机制。结果发现孕期DEHP暴露后造成:1、胚胎期生精小管数目显著减少,出生后生精小管管间和生精细胞间间隙增大、空泡化、断层、染色异常和脱落的细胞数目增加、生精细胞排列紊乱。2、睾丸生精细胞内质网明显肿胀;内质网应激相关蛋白GRP78相对表达量在出生后14d和28d显著下调,35d显著上调。3、内质网应激介导细胞凋亡的标志分子Cleaved Caspase 12的蛋白相对表达量,在出生后28d和35d显著上调;出生后35d睾丸细胞凋亡数目明显增加;睾丸中PCNA表达阳性的生精小管比例显著下调。4、间质细胞内脂滴数明显减少;部分线粒体形态异常;STARD10的蛋白相对表达量,在胚胎18.5d 675mg/kg/d剂量组显著下调;雄激素结合蛋白ABP1的表达量明显下降。综上所述,孕期DEHP暴露对发育早期的F1代雄性小鼠睾丸会造成比较明显的生殖损伤,可能是通过以下途径造成的:(1)改变内质网的形态结构,扰乱生精细胞内质网稳态,引发内质网应激,并通过内质网应激介导细胞凋亡;(2)抑制生精细胞增殖;(3)影响间质细胞内睾酮合成,降低雄激素在体内的有效浓度等。本研究初步探究了孕期DEHP暴露对F1代雄性小鼠睾丸早期发育的损伤及损伤机制,并首次以小鼠为动物模型将内质网稳态失衡、内质网应激介导的生精细胞凋亡作为DEHP诱导雄性生殖损伤的具体机制之一,为进一步了解人类孕期DEHP暴露与男性后代生殖系统损伤及生殖障碍的关系提供理论基础。