产毒素多杀巴氏杆菌的发酵培养及其生物学特性的研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:haose1989
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猪萎缩性鼻炎(AR)是猪的一种重要的慢性呼吸道传染病,在世界各地均有发生,是危害养猪业重要疫病之一。该病主要特征表现为鼻甲骨萎缩、口鼻部变形和生长迟滞。经过多年研究,现在大多数学者认为,支气管败血波氏杆菌(Bb)能引起一定程度的鼻粘膜和鼻甲骨损害,但这些病变的严重后果是为正常猪鼻腔不能定居的产毒素多杀巴氏杆菌(T+Pm)建立感染铺平道路,Bb和T+Pm的混合感染加上非传染因素交织在一起,是在自然条件下临床型AR的发生原因。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所研究人员成功地研制出猪萎缩性鼻炎油乳剂二联灭活疫苗,经过多年的现地应用证实,该疫苗安全有效,在我国猪萎缩性鼻炎的防制上发挥着巨大作用。该疫苗研制后很长时间内采用传统的通气式方法培养细菌,这种方法不仅费时,而且产量低、成本高。 为提高猪传染性萎缩性鼻炎疫苗生产效率,采用工作容积15立升的BIOSTAT·C型发酵罐,培养经鉴定作为制苗菌株的产毒素多杀巴氏杆菌Pm 13-1株。通过菌液取样测定细菌浓度,选择适于T+Pm发酵培养的通气流量、搅拌速度及pH值等技术参数;通过不同时段取样检测菌液浓度确定适宜的收获时间。将各适宜条件优化组合,Pm 13-1株发酵培养细菌浓度可达450—460亿/毫升,是过去玻璃瓶通气培养细菌浓度的7—8倍。为检验该培养方法培养出的T+Pm是否符合对T+Pm制苗用菌液的生物学特性鉴定标准,分别取样作培养特性检验、菌体形态检验、糖发酵实验、T+Pm毒素产生的检测及荚膜型鉴定。实验结果表明,在适宜条件下D型产毒素Pm13-1株培养物符合其菌落、菌体形态特征;糖发酵实验结果符合其生化特性;其产毒素能力符合对制苗菌株产毒素、致病变能力的要求,且未发生血清型的变化。
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