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农田的大规模种植,使得病虫害越发严重,从而导致目前盛行的化学防治方法过量滥用,导致了病原菌对药物产生抗药性,继而又开始增加药量的一个恶性循环,而人们对环境安全、食品安全等问题的关注也日渐增加,而生物防治对策正是在此时萌发并发展。从青海高原环境的植物根际土壤中采集的土样,分离得到的菌株QHL-52和QHL-30,通过菌落形态特征、显微镜特征、生理生化特性和保守区序列扩增分析等手段,将其鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);用平板对峙的方法和牛津杯的方法测定其抑菌谱,2株拮抗菌对多种植物病原菌,包括真菌和细菌,都有抑制作用;离体防效测定结果表明,2株拮抗菌的粗发酵液能有效防治番茄灰霉病(Botrytis cinerea);通过透明圈法检测到2株拮抗菌均能产生嗜铁素(CAS)、葡聚糖酶、蛋白酶和淀粉酶。拮抗菌的发酵液进行硫酸铵沉淀得到粗蛋白,通过SDS-PAGE检测到有多条蛋白条带。用盐酸沉淀法对发酵液处理得到脂肽类抗生素,相关功能基因检测表明2株拮抗菌中都含有伊枯草菌素和丰原素2种脂肽类活性物质的合成基因,而无表面活性素的合成基因。抑菌机理探究试验表明2株拮抗菌均能够诱导植物自身产生抗性,其中处理组番茄果实的POD、SOD、PPO、PAL、APX、CAT活性均显著高于对照组,MDA的含量显著低于对照组的含量,说明拮抗菌能够诱导植物产生对自身有利的因素,抵御对自身不利的外界因素,与拮抗菌协同共同抵御不良环境或外界伤害。同时发酵液能破坏病原菌细胞结构,使灰霉菌菌丝产生结节,顶端膨大并产生大量分支,菌丝细胞缢裂,细胞质外泄导致细胞死亡,使孢子壁之间粘连或直接破裂,对孢子的萌发起到明显的抑制作用,并伴随有大量的晶体出现。对2株拮抗菌的抑菌物质进行分离纯化后,得到不同组分的抑菌物质,菌株QHL-52的主要抑菌物质为挥发性物质,同时通过对上清液中代谢物质的提取和分离纯化,得到的样品同样具有强烈的抑菌作用;QHL-30的主要抑菌物质初步确定为蛋白类物质,可能也有脂肽类抗生素的部分作用。